Phospho-INSR-Y1146/IGF1R-Y1131 Rabbit pAb for WB, ELISA - P06213 / P08069

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景: INSRおよびIGF1Rの機能と局在

• インスリン受容体 (INSR) は、リガンド結合後のインスリンの多面的な作用を媒介する受容体型チロシンキナーゼです。
• 活性化されたINSRは細胞内基質 (IRS1-4、SHC) をリン酸化し、PI3K-AKT (代謝作用) およびRas-MAPK (細胞成長と分化) という2つの主要なシグナル伝達経路の活性化を導きます。
• PI3K-AKT経路は、グルコーストランスポーターSLC2A4/GLUT4の移行、BADのリン酸化を介した抗アポトーシス効果、およびmTORC1シグナル伝達を促進します。一方、Ras-MAPK経路は遺伝子発現を調節し、細胞増殖のためにPI3Kと協調します。
• INSRはIGF1Rとハイブリッド受容体を形成します。INSRアイソフォームLongを含むハイブリッド受容体は、IGF1により高親和性で、IGF2により低親和性で活性化され、インスリンによる活性化は顕著ではありません (PubMed:12138094)。アイソフォームShortを含むものは、IGF1、IGF2、およびインスリンにより活性化されます。別の研究では、両ハイブリッド型に類似した結合特性が示唆されています (PubMed:16831875)。 関連文献: PMID:12138094 PMID:16831875
• 細胞内局在には、細胞膜、後期エンドソーム、リソソームが含まれ、これは受容体の内在化と輸送を反映しています。
• アイソフォームLongおよびShortは、主にインスリン標的組織 (肝臓、脂肪、骨格筋) で発現し、また様々な他の組織や腫瘍でも見られます。アイソフォームShortは胎児細胞で優先的に発現します。
• INSRは、Y1146を含む複数のチロシン残基で自己リン酸化を受け、これは下流のシグナル伝達に重要です。
• 主要な構造的特徴には、選択的スプライシング、細胞外リガンド結合ドメイン、膜貫通ヘリックス、および細胞内チロシンキナーズドメインが含まれます。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• リン酸化特異的検出のためには、溶解バッファーにホスファターゼ阻害剤を含め、アルカリホスファターゼでサンプルを処理するか、非リン酸化ペプチド競合を用いて特異性を検証してください。
• インスリン刺激した細胞株などの適切な陽性対照を使用し、ウェスタンブロットでは155 kDa付近のバンドを確認してください。
• ELISAでは、コーティング条件を最適化し、リン酸化ペプチド標準品を用いてアッセイの直線性を確認してください。
• 本抗体はINSRとIGF1Rの両方のリン酸化型を認識する可能性があるため、ご使用の系での標的の同一性を確認してください。

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