リン酸化MEK1-T292 ウサギモノクローナル抗体（WB、ELISA用） - Q02750

主な製品仕様・パラメータ

生物学的背景：MEK1の機能と局在

• MEK1（MAP2K1）はMAPK/ERKシグナル伝達経路に必須の二重特異性プロテインキナーゼで、ERK1/2（MAPK3/1）のトレオニン残基とチロシン残基をリン酸化し、下流へシグナルを伝達します。
• RASおよびRAF1の下流で機能し、成長因子、サイトカイン、ホルモンからのシグナルを伝達して、細胞増殖、接着、生存、分化を制御します。
• MEK1はKSR1またはKSR2足場タンパク質と結合することでBRAFの活性化を促進します。この機構により自己阻害が解除され、二量体化が促進されます。 関連文献: PMID:29433126
• 本タンパク質は細胞質、中心体、紡錘極、核、膜など複数の細胞内部位に局在しており、多様なシグナル伝達や有糸分裂への関与を可能にしています。
• MEK1は広範に発現しており、脳での発現量が非常に少ないです。これは基本的な細胞プロセスの制御に遍在的に関与することと一致しています。
• Thr292のリン酸化をはじめとする翻訳後修飾やアセチル化によりMEK1の活性が精密に調節されており、変異は心筋症、外胚葉異形成症、知的障害と関連しています。

実験ガイダンス・技術的なヒント

• 免疫原はヒトMEK1（UniProt Q02750）のThr292周辺残基に対応する合成リン酸化ペプチドです。ウエスタンブロットの場合、リン酸化依存的なシグナルを維持するため、細胞溶解バッファーにホスファターゼ阻害剤を添加することを推奨します。
• ELISAでは、リン酸化ペプチドによる抗原コーティングには、リン酸化特異性を確保するためにコーティングバッファーとブロッキング条件の最適化が必要になる場合があります。
• MEK1はヒト、マウス、ラット間で高度に保存されているため、本抗体は3種すべてでリン酸化型を検出できると予想されます。ただし、交差反応性は対象の種・組織/細胞種ごとに実験的に確認する必要があります。
• WBの場合、予測される分子量は約43 kDaです。特異性を確認するため、適切なリン酸化部位対照（ラムダホスファターゼ処理など）を用いてバンドサイズを検証してください。
• 本抗体はリン酸化特異的抗体であるため、ELISAなどの定量的アプリケーションではロット間の一致性が重要です。ばらつきを最小限に抑えるため、力価測定と非リン酸化ペプチド対照による並行試験を推奨します。

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