Phospho-NF-κB p105-S932 Rabbit mAb for WB, ELISA - P19838

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：NF-κB p105の機能と局在

• NFKB1はp105前駆体タンパク質をコードし、これはタンパク質分解的に処理されてNF-κB転写因子複合体の活性なp50サブユニットを生成します (PubMed:1423592)。 関連参考文献： PMID:1423592
• p50サブユニットはRELA/p65と会合してp65-p50ヘテロ二量体を形成します。これは最も豊富なNF-κB複合体であり、標的遺伝子プロモーター内のκBサイト (5'-GGRNNYYCC-3') に結合して転写を活性化します (PubMed:1740106, PubMed:7830764)。 関連参考文献： PMID:1740106, PMID:7830764
• NF-κBは、免疫応答、炎症、アポトーシス、および細胞増殖の中心となる多面的な転写因子であり、IκB阻害タンパク質および多様な刺激によって調節されています。
• p105タンパク質は、N末端Rel相同ドメイン（RHD）とC末端アンキリンリピートを含んでいます。これはNF-κB二量体の細胞質保持因子として機能し、それらを不活性な状態で隔離します。
• 活性化シグナルを受けると、IκBキナーゼ（IKK）がIκBをリン酸化し、その分解とNF-κB二量体の放出が引き起こされます。その後、二量体は核に移行して遺伝子発現を調節します。
• p50ホモ二量体は、BCL3と会合しない限り転写抑制因子として作用し、NF-κBの二量体特異的な調節の多様性を強調しています。
• リン酸化、アセチル化、ユビキチン化、S-ニトロシル化を含む翻訳後修飾は、NF-κB活性を微調整します。セリン残基（例：S932）でのリン酸化は、p105のプロセシングと活性化に関与しています。
• 細胞内局在は、p105では主に細胞質ですが、活性なp50含有二量体は細胞質と核の間を移動します。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原は、ヒトNF-κB p105のSer932周辺の残基に対応する合成リン酸ペプチドです。ウェスタンブロットでは、約105 kDa (p105) の主要なバンド、および場合によっては約50 kDa (p50) のバンドが期待できます。ホスファターゼ処理によるライセートの処理、または非リン酸化特異的抗体との比較により、リン酸化特異性を検証してください。
• ELISAアプリケーションの場合、リン酸化ペプチドまたは刺激細胞ライセートを使用して、抗体濃度を滴定および最適化します。非特異的結合を低減するために、適切なブロッキング工程を含めてください。
• 本抗体はマウスおよびラットとの交差反応性があるため、関連する細胞株（Jurkat、HeLa、RAW 264.7など）をポジティブコントロールとして使用することを検討してください。TNF-α、LPS、またはPMA/イオノマイシンによるNF-κBシグナル伝達の誘導は、検出を増強できます。
• NF-κBファミリーメンバーは類似性を持っているため、特異性を確認するために、常に分子量マーカーと適切なコントロールを含めてください。

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