Phospho-NF-kB p65/RelA-S536 ウサギモノクローナル抗体（WB、ELISA用） - Q04206

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景：転写因子p65の機能と局在

• タンパク質の同一性と複合体形成: 転写因子p65 (RELA) は、NF-kB転写因子複合体の重要なサブユニットです。他のNF-kB/Relファミリータンパク質とホモまたはヘテロ二量体を形成し、RELA-NFKB1ヘテロ二量体が最も豊富で転写活性化因子として機能します。
• 中核的な生物学的役割: NF-kBは、炎症、免疫、細胞分化、増殖、アポトーシスを含む幅広い生物学的プロセスを調節します。T細胞におけるサイトカイン遺伝子発現に必須です。
  関連文献: PMID:15790681
• 抗ウイルス応答: RELAは、SARS-CoV-2感染時のインターフェロン応答における重要な転写因子として機能します。
  関連文献: PMID:33440148
• 細胞内局在と活性化: 未刺激細胞では、NF-kBはI-kB阻害タンパク質によって細胞質に隔離されています。刺激を受けると、I-kBはIKKによってリン酸化され分解されるため、RELAは核へ移行し、標的遺伝子の転写を活性化することができます。
• Ser536でのリン酸化: RELAのSer536でのリン酸化は、その転写活性を増強し、核への局在を促進し、コアクチベーターとの相互作用を調節する可能性がある重要な翻訳後修飾です。
• その他の修飾と宿主相互作用: リン酸化に加えて、RELAはアセチル化、メチル化、ユビキチン化、S-ニトロシル化によって修飾され、宿主-ウイルス相互作用にも関与します。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• この抗体は、ヒトRELAのSer536周辺の残基に対応する合成リン酸化ペプチドを用いて作製されており、タンパク質のリン酸化型を特異的に認識することが期待されます。
• ウェスタンブロッティング（WB）では、Ser536リン酸化を誘導するために、既知のNF-kB活性化因子（例：TNF-α、LPS）で細胞を刺激することを検討してください。リン酸化エピトープを保持するために、細胞溶解バッファーにホスファターゼ阻害剤を含めてください。
• リン酸化シグナルの特異性は、刺激済みサンプルと未刺激サンプルを比較するか、WBの前にラムダホスファターゼでリサートを処理することによって検証してください。
• ELISAアプリケーションでは、リン酸化タンパク質検出のためのアッセイ条件を最適化し、特異性を確保するためにリン酸化特異的検出抗体の使用を検討してください。
• この抗体はマウスおよびラットRELAと交差反応することが報告されています。これらの種からの適切なリサートで反応性を確認してください。

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