Phospho-NF-kB p65/RelA-S536 ウサギポリクローナル抗体 - Q04206

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：NF-kB p65/RelAの機能と局在

• NF-kB p65/RelAは、NF-kB転写因子複合体のサブユニットであり、ほぼすべての細胞種に存在する多面的な調節因子です。炎症、免疫、分化、細胞成長、腫瘍形成、およびアポトーシスに関与する遺伝子を制御します。
• 最も豊富なNF-kBの形態はRELA-NFKB1ヘテロ二量体であり、異なる親和性でカッパ-B DNAサイトに結合します。異なる二量体の組み合わせは、転写活性化因子または抑制因子として機能します。
• 静止細胞では、NF-kBはIkB阻害因子によって細胞質に保持されています。刺激を受けると、IkBのリン酸化と分解によってNF-kBが解放され、核移行と標的遺伝子の活性化が可能になります。
• RELAは、リン酸化、アセチル化、メチル化、およびユビキチン化を含む広範な翻訳後修飾を受けます。これらは、その転写活性、安定性、およびタンパク質相互作用を調節します。転写活性化ドメイン内のS536のリン酸化は、転写出力を増強します。
• T細胞におけるサイトカイン遺伝子発現に不可欠であり、自然免疫と適応免疫の応答を架橋します。 関連参考文献： PMID:15790681
• SARS-CoV-2感染中のインターフェロン応答を調節する主要な転写因子であり、抗ウイルス自然免疫におけるその役割を強調しています。 関連参考文献： PMID:33440148
• 細胞内局在は、核局在シグナルとIkB相互作用によって制御され、核と細胞質の間で動的にシャトルします。

実験的ガイダンスと技術的なヒント

• S536リン酸化エピトープを保持し、シグナルの喪失を防ぐために、溶解およびインキュベーションバッファーにホスファターゼ阻害剤を使用してください。
• ウェスタンブロット実験では、リン酸化特異的変化を確認するために、常に全NF-kB p65抗体をローディングおよび正規化コントロールとして含めてください。
• IHC-Pの場合は、抗原回復と内在性ペルオキシダーゼのブロックを最適化してください。リン酸化特異的染色を確認するために、組織切片のホスファターゼ処理を検討してください。
• ELISAアプリケーションでは、各アッセイ形式について、経験的に最適な抗体希釈倍率と検出条件を決定してください。

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