Phospho-NF-kB p65/RelA-T505 ウサギポリクローナル抗体 - Q04206

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：NF-kB p65/RelAの機能と局在

• NF-kB p65/RelAはNF-kB転写因子複合体のサブユニットであり、炎症、免疫、細胞成長、分化、腫瘍形成、およびアポトーシスに関与する遺伝子を制御するために、多様な刺激によって活性化される多面的な調節因子です。
• 活性型NF-kB複合体はRelファミリータンパク質のホモダイマーまたはヘテロダイマーであり得ます。RELA-p50ヘテロダイマーが最も豊富な形態であり、標的DNAのk-Bサイトに結合して転写活性化因子として機能します。
• 他のRelファミリーメンバーには、RELB、NFKB1 (p105/p50)、NFKB2 (p52)、およびc-RELが含まれ、特異性と機能的多様性をもたらす独自のダイマー組み合わせを形成します。
• 静止細胞では、NF-kBは阻害タンパク質I-kBとの相互作用により細胞質に保持されています。刺激を受けると、I-kBのリン酸化と分解が起こり、NF-kBが放出されて核内移行します。
• RELAは、T細胞におけるサイトカイン遺伝子発現に不可欠であり、適応免疫における重要な機能です。 関連文献： PMID:15790681
• SARS-CoV-2感染中、RELAはインターフェロン応答を調節する重要な転写因子として機能します。 関連文献： PMID:33440148
• このタンパク質は、その活性、安定性、相互作用を調節する広範な翻訳後修飾（リン酸化、アセチル化、メチル化、ユビキチン化など）を受けます。
• 細胞内局在は核と細胞質の間で循環し、Thr505を含む様々な部位でのリン酸化が転写活性や複合体の動態に影響を与えます。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原はThr505を含む合成リン酸化ペプチドであるため、抗体の反応性はリン酸化に依存します。リン酸化エピトープを保持するために、ホスファターゼ阻害剤を使用してサンプルを調製してください。
• ウェスタンブロットについては、標準的なSDS-PAGEおよび転写プロトコルを使用してください。リン酸化RELAの期待されるバンドサイズは約60 kDaです。ブロッキングと抗体希釈条件は、実験的に最適化してください。
• ELISAでは、リン酸化ペプチドまたはタンパク質ライセートによるプレートコーティングが使用できます。実験系において非リン酸化型との交差反応性を評価する必要があります。
• この抗体はヒトサンプルと反応性があります。他の種については、使用前にThr505周辺の配列相同性を確認してください。

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