WB用 Phospho-NFKB1-S337 ウサギ PolymAb® - P19838

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：NFKB1の機能と局在

• NFKB1はp105前駆体をコードし、プロテアソームを介した処理を受けて、転写因子複合体NF-κBの活性サブユニットp50を生成する（PubMed:1423592）。 関連参考文献：
  PMID:1423592

• p50サブユニットは、RELA/p65、RELB、RELなどの他のNF-κB/Relファミリーメンバーとホモまたはヘテロ二量体を形成し、κBコンセンサスDNA配列5'-GGRNNYYCC-3'に結合して遺伝子発現を調節する（PubMed:1740106, PubMed:7830764）。 関連参考文献：
  PMID:1740106
  PMID:7830764

• NF-κBは、免疫・炎症応答、細胞増殖、分化、アポトーシスの中心的メディエーターであり、p65-p50ヘテロ二量体が最も豊富で転写活性化複合体である。

• 不活性なNF-κB二量体は、IκBインヒビターによって細胞質に保持されている。刺激を受けると、IκBはリン酸化され分解され、NF-κBが核へ移行して標的遺伝子を活性化できるようになる。

• NFKB1はまた、関連するNF-κBタンパク質のためのp105を介した細胞質保持アンカーとして機能し、MAP3K8と複合体を形成して、p105の分解により活性型MAP3K8が放出されるまでMAPKシグナル伝達を抑制する。

• このタンパク質は、その活性、安定性、細胞内局在を調節するリン酸化、アセチル化、ユビキチン化、ヒドロキシル化を含む複数の翻訳後修飾を受ける。

• 細胞内局在は細胞質と核の両方を含み、シグナルの隔離と転写調節における二重の役割を反映している。

• 選択的スプライシングによって産生される選択的アイソフォームは機能的多様性に寄与する。全長p105タンパク質（105 kDa）と処理済みp50サブユニット（50 kDa）は、ほとんどの細胞型で検出される。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• この抗体はリン酸化特異的であるため、サンプル調製中のリン酸化シグナルを保持するために、溶解バッファーにホスファターゼ阻害剤を含めることが必須である。
• ウェスタンブロットでは、既知のNF-κB経路活性化（例：TNF-α処理細胞）による陽性対照の使用を推奨する。約105 kDa（p105）および50 kDa（p50）付近のバンドの検出を確認すること。
• 免疫組織化学では、抗原賦活化条件と抗体希釈率を最適化する必要がある。染色パターンが、経路活性化時に予想される核/細胞質局在を反映していることを確認すること。
• この抗体はELISAに適している。定量的アッセイにはリン酸化ペプチドを標準として使用することを検討すること。

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