WB、IF/ICC、ELISA用 Phospho-p70 S6 Kinase 1-T421/S424 ウサギモノクローナル抗体 - P23443

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景: RPS6KB1 (p70 S6 Kinase 1) の機能と局在

• RPS6KB1 (p70 S6 kinase 1) は、セリン/スレオニンタンパク質キナーゼであり、mTORシグナル伝達経路の主要な下流エフェクターとして機能し、細胞増殖、増殖、生存を調節します。 関連文献: PMID:11500364, PMID:12801526, PMID:14673156
• このキナーゼは多部位リン酸化によって活性化され、特に自己抑制ドメインに位置するThr-421/Ser-424におけるmTORC1を介したリン酸化がその活性化に重要な役割を果たします。増殖刺激により、このリン酸化が引き金となり、EIF3翻訳開始複合体からの解離とそれに続くキナーゼ活性化が起こります。 関連文献: PMID:16286006
• EIF4B、RPS6、EEF2Kなどの翻訳機構の構成要素をリン酸化し、またEIF4A抑制因子PDCD4を不活性化することで翻訳開始を促進することにより、タンパク質合成を促進します。 関連文献: PMID:11500364, PMID:12801526, PMID:14673156, PMID:17053147
• RPS6KB1は、mTORC2構成要素であるMAPKAP1/SIN1およびRICTOR、ならびにmTORC1構成要素であるDEPTORをリン酸化することによりmTORシグナル伝達のフィードバック調節に関与し、それによってAKT1活性を調節します。 関連文献: PMID:15899889, PMID:19720745, PMID:19935711, PMID:22017876
• プロアポトーシス性タンパク質BADをリン酸化して阻害し、またミトコンドリアURI1-PPP1CC複合体のダイナミクスを調節することにより、細胞生存を仲介します。 関連文献: PMID:17936702
• 細胞内では、細胞質、核、ミトコンドリアおよびミトコンドリア外膜、シナプス区画に局在し、その多様な調節役割を反映しています。
• このタンパク質はヒト組織で広く発現しており、細胞恒常性におけるその基本的な役割を強調しています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• ウェスタンブロッティングでは、約59 kDaのバンドが期待されます。ホスファターゼ処理したライセートまたは非リン酸化ペプチドを用いた競合実験を使用して特異性を検証してください。
• 免疫蛍光法では、リン酸化エピトープを保持するために固定および透過処理条件を最適化してください。活性化依存的な局在変化を可視化するために、血清飢餓および刺激処理をテストすることを検討してください。
• ELISAアプリケーションでは、標的のリン酸化ペプチドをコーティングするか、サンドイッチ法を使用してリン酸化p70 S6Kを捕捉・検出し、検出抗体が特定のリン酸化を認識することを確認してください。
• マウスまたはラットのサンプルへの適用を拡張する場合は、配列相同性が結合に影響を与える可能性があるため、関連する組織または細胞株での交差反応性を確認してください。
• 免疫原の設計（T421/S424周辺の合成リン酸化ペプチド）はリン酸化特異性を保証します。常に、ラムダホスファターゼでサンプルを処理するか、非リン酸化抗体コントロールを使用して確認してください。

CamelBio: ワンストップ調達の架け橋

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