Phospho-PDK1/PDPK1-S241 ウサギ pAb - O15530

製品の中核的仕様とパラメータ

生物学的背景: PDK1 (3-ホスホイノシタイド依存性プロテインキナーゼ1) の機能と局在

• PDPK1 (PDK1) は、PKB/AKT、p70 S6K、p90 RSK、PKCアイソフォームを含むAGCキナーゼファミリーのマスターレギュレーターとして機能する、普遍的に発現するセリン/スレオニンキナーゼをコードする。 関連参考文献: PMID:10226025 PMID:10480933 PMID:10995762

• インスリンシグナル伝達において、PDK1はAKT1のThr308をリン酸化して活性化し、グルコース取り込み、グリコーゲン合成、細胞生存を制御する下流シグナルを伝達する。 関連参考文献: PMID:10226025 PMID:12167717 PMID:9094314

• PDK1は細胞質、核、細胞膜、接着斑に局在し、複数の細胞区画からの多様なシグナル伝達を可能にする。

• チロシンリン酸化型のPDK1は接着斑のダイナミクスに必須であり、肺、肝臓、結腸、乳房の疾患組織で発現が上昇している。 関連参考文献: PMID:14585963

• PDK1は追加の経路を調節する：SMADタンパク質をリン酸化することでTGF-βシグナル伝達を負に制御し、IKKBのリン酸化を介してNF-κBを活性化し、炎症および免疫応答に影響を与える。 関連参考文献: PMID:17327236 PMID:16207722

• PDK1は血管内皮細胞の運動性と走化性に重要であり、血管新生過程に関与する。 関連参考文献: PMID:17371830

実験ガイダンスと技術的ヒント

• リン酸化特異的抗体は慎重なサンプル取り扱いを要する：細胞溶解バッファーにホスファターゼ阻害剤を添加し、室温での長時間のサンプルインキュベーションを避ける。
• ウェスタンブロッティングでは、サンプルの一部をラムダホスファターゼで処理し、約63 kDaのバンドのリン酸化特異性を確認する。
• 免疫蛍光法 (IF/ICC) では、固定と透過処理の条件がエピトープへのアクセス性に影響する可能性があるため、最適なシグナルを得るために複数の固定方法（例：メタノール対ホルムアルデヒド）をテストする。
• マウスおよびラットとの交差反応性があるため、リン酸化部位および抗原領域の配列アラインメントにより、意図した種モデルでの抗体を検証する。
• ELISAアプリケーションでは、シグナル特異性を確保するためにリン酸化ペプチド競合体の使用が有効な場合がある。

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