Phospho-PKA RIIα (PRKAR2A)-S99 ウサギモノクローナル抗体（WB・ELISA用） - P13861

製品の主な仕様・パラメータ

生物学的背景：PRKAR2Aの機能と局在

• PRKAR2AはcAMP依存性プロテインキナーゼII-α型調節サブユニットをコードします。PKA全酵素の重要な構成要素であり、cAMPに対する細胞応答を調節しています。
• PKAの調節サブユニットとしてcAMPに結合すると、解離が起こり触媒サブユニットが活性化します。活性化した触媒サブユニットは代謝、遺伝子発現、細胞増殖に関わる下流の標的をリン酸化します。
• II型調節サブユニットは、Aキナーゼアンカリングタンパク質（AKAP、MAP2キナーゼを含む）に結合することで膜会合を媒介し、PKA活性を特定の細胞内区画に局在させます。
• ヒトゲノムには4種類の調節サブユニット（I-α、I-β、II-α、II-β）が存在します。PRKAR2AはII-αクラスに分類され、組織によって発現が異なり、恒常的に発現している組織と誘導される組織があります。
• PRKAR2Aは主に細胞質に局在し、アンカリングタンパク質との相互作用を介して細胞膜と会合することができ、cAMPシグナル伝達の空間的制御を可能にしています。
• このタンパク質は翻訳後修飾を受け、複数の部位（例：Ser99）のリン酸化やアセチル化が生じます。これらの修飾によって活性、安定性、または結合パートナーとの相互作用が調節されています。
• 選択的スプライシングによって複数のアイソフォームが生成され、リンタンパク質、アセチル化、cAMP結合といったキーワードに分類されており、動的な調節役割を持つことが反映されています。

実験ガイダンス・技術的なヒント

• 免疫原はSer99周辺の合成リン酸化ペプチドです。処理群と非処理群でシグナルを比較するか、非リン酸化ペプチドによるブロッキング対照を使用して、リン酸化特異性を確認することを推奨します。
• ウェスタンブロッティングでは46 kDa付近にバンドが検出されることが予想されます。内在性の発現量は試料によって異なる場合があるため、ご使用の試料系でブロッキング条件や抗体希釈率を最適化してください。
• ELISAでは、細胞または組織溶解液中のリン酸化PRKAR2Aの検出に抗体をご使用いただけます。アッセイの特異性を確認するため、適切な陽性対照および陰性対照を含めてください。
• ヒトとラットでの交差反応性が確認されています。マウス試料で使用する場合は、配列の違いが生じる可能性があるため、実験的に交差反応性を検証してください。
• PKAはシグナル伝達において重要な役割を担うため、Ser99のリン酸化は動的に変化する可能性があります。実験計画時にcAMP経路の刺激または阻害処理を実施することをご検討ください。

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