Phospho-PKCalpha/beta II-T638/641 ウサギpAb（WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用） - P17252 / P05771

主な製品仕様とパラメータ

生物学的背景：PKC alpha/beta IIの機能と局在

• プロテインキナーゼCアルファ型（PKC alpha）は、PRKCA遺伝子にコードされる、カルシウム依存性でリン脂質・ジアシルグリセロール依存性のセリン/スレオニンプロテインキナーゼです。細胞増殖、アポトーシス、分化、遊走、接着、腫瘍形成、心肥大、血管新生、血小板機能、炎症の調節に中心的な役割を果たしています。
• PKC alphaは細胞質、細胞膜、ミトコンドリア膜、核に局在し、活性化に伴って動的に特定の区画へ移行し、多様な機能を発揮します。
• ケモカイン誘導性CD4+T細胞遊走において、PKC alphaはCDC42-グアニン交換因子DOCK8をリン酸化し、LRCH1からの解離を引き起こした後にGTPase CDC42を活性化することで、細胞運動性を促進します。 関連文献: PMID:28028151
• アンジオテンシンIIシグナル伝達に応答して、PKC alphaはKLHL3の「Ser-52」をリン酸化し、KLHL3とWNK4の相互作用を減少させることで、イオン輸送と血圧調節を制御しています。 関連文献: PMID:25313067
• PKC alphaはLRRK1をリン酸化して活性化すると、LRRK1は細胞内輸送に関与するRABタンパク質をリン酸化することから、小胞輸送における役割が示されています。 関連文献: PMID:36040231
• 神経膠腫や乳がんをはじめとする様々ながんで高発現しており、腫瘍プロモーターとして作用し、細胞増殖、アポトーシス、遊走の調節を通じて悪性形質に関与しています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はヒトPKCalpha/beta IIのT638周辺の合成リン酸化ペプチドです。分析前にPMAまたはその他のPKC活性化剤で細胞を処理し、T638/641のリン酸化を増強することで、実験系における抗体の妥当性を検証することを推奨します。
• ウエスタンブロッティングでは、サンプル調製時に適切なホスファターゼ阻害剤を使用し、リン酸化エピトープを保護してください。76～77 kDa付近にバンドが検出されることが予想されます。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、必要に応じて抗原賦活化を実施し、インキュベーション工程にホスファターゼ阻害剤を添加してリン酸化シグナルを維持してください。
• 免疫蛍光/免疫細胞化学（IF/ICC）では、活性化に伴うリン酸化型PKCの細胞質から膜への移行をモニターすることを陽性対照として使用できます。
• ELISAでは、リン酸化ペプチドと非リン酸化ペプチドの両方を用いて特異性を検証し、リン酸化特異性を確認してください。

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