Phospho-PKCδ/θ-S643/676 ウサギ pAb - Q05655/Q04759

中核製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：プロテインキナーゼC デルタ型の機能と局在

• プロテインキナーゼC デルタ (PKCδ) は、PRKCD遺伝子にコードされ、カルシウム非依存性、リン脂質およびジアシルグリセロール (DAG) 依存性のセリン/スレオニンプロテインキナーゼであり、新規PKCサブファミリーに属する。nPKC-デルタとも呼ばれ、チロシンプロテインキナーゼ活性も有する。
• PKCδはアポトーシスにおいて二重の役割を果たす：DNA損傷誘発性アポトーシスではプロアポトーシスタンパク質として、サイトカイン受容体開始性細胞死では抗アポトーシスタンパク質として機能する。関連文献: PMID:21406692, PMID:21810427
• B細胞増殖の調節因子として機能し、自己抗原誘発性B細胞寛容誘導に重要である。
• 酸化ストレスに応答して、PKCδは核内でCHUK/IKKAをリン酸化して活性化し、p53/TP53のリン酸化と下流のアポトーシスシグナル伝達を引き起こす。関連文献: PMID:21406692, PMID:21810427
• PKCδはがんにおいて対照的な役割を示す：増殖刺激時には腫瘍抑制因子として働く一方、多くのがんで高発現しており、NF-kappa-B、AKT1、MAPK1/3などの経路を介して細胞生存と化学療法耐性を促進する。関連文献: PMID:15774464
• 好中球および好酸球におけるNADPHオキシダーゼ活性とスーパーオキシドアニオン産生に必要であり、NCF1 (p47-phox) のリン酸化を伴う。関連文献: PMID:19801500, PMID:11748588
• 細胞質、核周辺領域、核、細胞膜、ミトコンドリア、内膜系などへのサブセルラー局在は、その動的なシグナル伝達役割を反映している。
• PKCδは特徴的なホルボールエステル/DAG型亜鉛フィンガードメインを含み、その機能とサブセルラー分布を調節する選択的スプライシング、リン酸化、およびその他の翻訳後修飾を受ける。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• この抗体は、ヒトPKCδのSer643 (PKCθのSer676と相同性を共有する) に対応する合成リン酸化ペプチドに対して作製されているため、両キナーゼのリン酸化型を特異的に認識することが期待される。使用するモデル系における関連標的との交差反応性を確認すること。
• ウェスタンブロットでは、選択的スプライシングと翻訳後修飾により、予測される分子量は77 kDaおよびその他のアイソフォーム (67, 74, 80, 81 kDa) を含む。リン酸化特異性を確認するため、ホスファターゼ処理リシートを陰性対照として含めること。
• PKCδの活性化とSer643でのリン酸化は、ホルボールエステル (例：PMA)、酸化ストレス (例：H2O2)、またはDNA損傷剤によって刺激される。細胞または組織リシートを調製する際は、適切な刺激条件を考慮すること。
• ELISAでは、この抗体は細胞リシートまたは精製タンパク質中のリン酸化PKCδ/θの検出に使用できる。標準的な手順に従って、コーティングおよび検出条件を最適化すること。

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