WB、IHC-P、ELISA用 リン酸化Raf1-S338 ウサギpAb - P04049

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景：Raf1の機能と局在

• RAF1は、Raf-1セリン/スレオニン-タンパク質キナーゼ（c-RAFとしても知られる）をコードし、細胞増殖、分化、アポトーシス、発癌性形質転換を制御するRAS-RAF-MEK-ERKシグナル伝達経路の重要な伝達因子です。
• Raf1の活性化には、PAK1によるSer338（およびSer339）でのリン酸化が必要であり、これがキナーゼカスケードを引き起こします：Raf1はMEK1/2をリン酸化して活性化し、MEK1/2は次にERK1/2をリン酸化します。
• リン酸化されたRaf1（p-Ser338）は、BADのSer75を直接リン酸化し、そのアポトーシス促進機能を阻害して細胞生存を促進します。
• Raf1は、細胞質、細胞膜、ミトコンドリア、核など複数の細胞区画に分布しており、状況依存的なシグナル伝達を可能にしています。ミトコンドリアのRaf1はBCL2に結合してアポトーシスを阻害します。
• 骨格筋では、Raf1のアイソフォーム1がアイソフォーム2よりも多く存在し、組織特異的な調節が示唆されています。
• RAF1の変異はヌーナン症候群や肥大型心筋症に関連しており、この遺伝子は確立されたプロトオンコジーンであり、ヒト癌で高頻度に過剰活性化されています。
• 主要な翻訳後修飾には、セリン/スレオニン/チロシンリン酸化、メチル化、ユビキチン化が含まれ、これらがRaf1の活性と安定性を微調整します。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はSer338周辺の合成リン酸化ペプチドです。したがって、この抗体はこの部位がリン酸化された場合にのみRaf1を特異的に認識します。ウェスタンブロッティングでは、細胞溶解バッファーにホスファターゼ阻害剤を添加し、EGFや血清で処理してリン酸化を刺激することを検討してください。
• IHC-Pでは、ホスファターゼ処理の有無による染色を比較してリン酸化特異性を確認してください。リン酸化エピトープに対しては、抗原賦活化条件の最適化が必要な場合があります。
• この抗体はWB、IHC-P、ELISAで検証済みです。定量的ELISAを行う場合は、特異性を確認するために適切なリン酸化ペプチドおよび非リン酸化ペプチドコントロールを使用してください。
• 供給元のデータに基づき、ヒト、マウス、ラットのRaf1と交差反応します。一貫した性能を確保するために、目的のサンプルシステムで検証してください。

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