Phospho-Rpb1 CTD-S2/S5 Rabbit mAb - P24928

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：DNA指向性RNAポリメラーゼIIサブユニットRPB1の機能と局在

• DNA指向性RNAポリメラーゼIIサブユニットRPB1（POLR2Aとしても知られる）は、RNAポリメラーゼIIの最大かつ触媒コア成分であり、mRNA前駆体および多くの機能性非コードRNAの合成を担います。 関連参考文献： PMID:23748380 PMID:27193682 PMID:30190596
• Pol II転写サイクルには、開始、伸長、終結が含まれます。開始段階では、プレ開始複合体がプロモーターに集合し、伸長はプロセッシブなRNA合成を伴い、終結は転写産物の放出をもたらします。 関連参考文献： PMID:23748380 PMID:27193682 PMID:28108474
• この酵素は2金属イオン機構を介してヌクレオチド付加を触媒し、POLR2AはMg²⁺配位性のDxDGDモチーフを提供し、POLR2Bは追加的な配位を提供します。 関連参考文献： PMID:30190596 PMID:8381534 PMID:9852112
• 3'→5'エキソヌクレアーゼ校正活性を持ち、取り込まれた誤ったヌクレオチドの除去を可能にします。 関連参考文献： PMID:8381534
• 特有のC末端ドメイン（CTD）は52個のヘプタペプチド反復（YSPTSPS）からなり、主にSer2およびSer5で動的なリン酸化を受け、プロモーターエスケープ、伸長、およびmRNAプロセシングを調節します。 関連参考文献： PMID:24207025 PMID:26124092
• CTDのリシンアセチル化とメチル化は遺伝子発現のバランスをとり、アセチル化は増殖因子誘導性遺伝子の転写を促進し、メチル化は一般的に発現を抑制します。 関連参考文献： PMID:24207025 PMID:26124092
• さらに、RPB1はRNA依存性RNAポリメラーゼとして機能して非コードRNAを伸長させ、デルタ肝炎ウイルスの複製に関与します。
• 細胞内局在：主に核ですが、細胞質や染色体とも関連しています。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• ウェスタンブロットを行う際は、CTDのリン酸化を維持するために、ライシスバッファーにホスファターゼ阻害剤が含まれていることを確認してください。リン酸化特異性を確認するために、ホスファターゼ処理対照を含めてください。
• クロマチン免疫沈降（ChIP）およびCUT&Tagの場合、この抗体はゲノム全体にわたるRNAポリメラーゼIIの占有率とSer2/Ser5リン酸化パターンのプロファイリングに役立ちます。
• ELISAでは、この抗体を使用して、ライセートまたは精製サンプル中のリン酸化POLR2Aレベルを定量できます。

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