Phospho-Rpb1 CTD-T4 ウサギモノクローナル抗体（WB、ELISA用） - P24928

製品コア仕様・パラメータ

生物学的背景：DNA依存性RNAポリメラーゼIIサブユニットRPB1の機能と局在

• DNA依存性RNAポリメラーゼIIサブユニットRPB1はPolIIの触媒コアであり、開始、伸長、終結を含む転写サイクルにおいてmRNA前駆体および非コードRNAの合成を担っています。 関連文献: PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:30190596, PMID:28108474
• RPB1はサブユニットRPB2と共に活性中心を形成し、Mg²⁺に配位されたDxDGDモチーフを介してヌクレオチド付加を触媒し、3′→5′エキソヌクレアーゼ活性によって誤って取り込まれたヌクレオチドを校正します。 関連文献: PMID:8381534, PMID:9852112, PMID:30190596
• RPB1に特有のC末端ドメイン（CTD）は52個のヘプタペプチドリピートから構成され、転写に共役したプロセスの動的なプラットフォームとして機能します。Ser5のリン酸化はプロモーター脱退を促進し、Ser2のリン酸化は伸長およびプレmRNAプロセシングに不可欠です。CTDのリジンのアセチル化とメチル化は、さらに遺伝子発現を精密に調節します。 関連文献: PMID:24207025, PMID:26124092
• DNA依存性転写に加え、RPB1は非コードRNAを伸長するRNA依存性RNAポリメラーゼ活性を有し、デルタ肝炎ウイルスの複製酵素・転写酵素として作用することもあります。
• RPB1は主に核および染色体上に局在しますが、細胞質にも存在することがあります。
• RPB1の翻訳後修飾には、リン酸化、アセチル化、メチル化、ユビキチン化、ISG化があり、活性や相互作用が調節されています。
• POLR2Aの変異は、知的障害（NEDHIB）を含む神経発達障害と関連しています。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• ウェスタンブロッティングを実施する際は、T4のリン酸化を維持するために溶解バッファーにホスファターゼ阻害剤を添加し、グラジエントゲルまたは高濃度の分離ゲルを使用して、217 kDaのバンドを明確に分離してください。
• ELISAの場合は、修飾エピトープに対する特異性を確認するため、リン酸化ペプチドまたはリン酸濃縮タンパク質抽出物でコーティングすることを検討してください。
• 本抗体はヒト、マウス、ラットと交差反応することから、T4モチーフが保存されていることが示唆されます。実験系に応じて、該当する種およびサンプルタイプでの特異性を検証してください。

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