リン酸化Smad2 (S245/S250/S255) ウサギmAb（WB・ELISA用） - Q15796

製品コア仕様・パラメータ

生物学的背景：SMAD2の機能と局在

• SMAD2（Mothers against decapentaplegic相同体2）は受容体制御型SMAD（R-SMAD）であり、TGF-β（トランスフォーミング増殖因子）およびアクチビンI型受容体キナーゼの細胞内シグナル伝達因子・転写調節因子として機能します。
• C末端のSXSモチーフ（セリン残基465および467）がリン酸化されると、SMAD2はSMAD4と複合体を形成して核内に移行し、標的遺伝子プロモーターのTGF-β応答配列（TRE）に結合して転写を調節します。
• SMAD2は、阻害性14-3-3タンパク質YWHAQからの解離を促進することで、PDPK1キナーゼ活性を正に制御します。
• 結腸直腸がんにおける腫瘍抑制因子としての関与が示されています。 関連文献: PMID:8752209
• 細胞内では、SMAD2は細胞質と核の間を往復輸送され、これはシグナル伝達における役割と一致しています。
• 骨格筋、内皮細胞、心臓、胎盤で高発現しています。
• 翻訳後修飾にはリン酸化、アセチル化、ユビキチン化があり、これらがSMAD2の活性、安定性、相互作用を調節しています。
• 選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが生成され、タンパク質はDNA結合を媒介する亜鉛イオン結合ドメイン（MH1ドメイン）を保有しています。

実験ガイダンス・技術的 Tips

• 本抗体はリン酸化ペプチドを免疫原として作製されているため、サンプル調製中にリン酸化状態を維持するため、サンプル溶解バッファーにはホスファターゼ阻害剤（例：オルトバナジウム酸ナトリウム、フッ化ナトリウム）を添加してください。
• ウエスタンブロッティングでは、未処理細胞溶解液とTGF-β/アクチビン刺激細胞溶解液の両方を電気泳動することで、活性化依存的なバンドシフトを確認することを推奨します。
• WBにおける推奨開始希釈率は1:500～1:2000ですが、最適な濃度はご使用のサンプル系に応じて実験的に決定してください。
• ELISAでは、ホスファターゼ活性の低いブロッキングバッファーを使用することでバックグラウンドを低減できます。特異性確認のため、リン酸化ペプチド競合アッセイの実施をご検討ください。
• ウサギモノクローナル抗体であるため、検出にはHRPまたはAPが結合した抗ウサギIgG (H+L) 二次抗体を使用してください。

CamelBioについて：ワンストップ調達ブリッジ

CamelBioは診断薬メーカーや研究機関と提携し、検証済み抗体ペア、最適化されたモノクローナル抗体・ポリクローナル抗体、バルク補助試薬を含む包括的なIVD原材料ポートフォリオを提供しています。TGF-βシグナル伝達経路やリン酸化SMAD2検出を対象としたプロジェクトにおいて、CamelBioはカスタマイズされた調達サポートを提供し、構想から臨床開発までアッセイ開発を加速します。