Phospho-Src-Y529 ウサギポリクローナル抗体 (WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA用) - P12931

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：Srcの機能と局在

• プロトオンコジーン・チロシン・タンパク質キナーゼSrc (c-Src) は、SRC遺伝子（Gene ID: 6714）によってコードされる約60 kDaの非受容体型チロシンキナーゼです。別名としてASV、SRC1、THC6、p60-Srcなどがあります。選択的スプライシングにより3つのアイソフォームが生じ、アイソフォーム1が正準配列を表します。
• Srcは、多様な受容体タイプ（免疫、インテグリン、増殖因子、GPCR）からのシグナル伝達を媒介し、遺伝子転写、免疫応答、細胞接着、細胞周期進行、アポトーシス、遊走、および形質転換を制御します (PubMed:34234773, PubMed:21411625)。 関連文献: PMID:34234773, PMID:21411625
• AFAP1、コルタクチン (CTTN)、FAK (PTK2)、パキシリンなどの基質のリン酸化を通じて、Srcは細胞骨格の再編成、焦点接着のダイナミクス、および細胞間結合のシグナル伝達を調整します。
• Srcは細胞膜、ミトコンドリア内膜、核、細胞質、細胞骨格、細胞結合に局在し、空間的に制限されたシグナル伝達を可能にします。
• 本抗体は、Tyr529がリン酸化されたSrcを特異的に認識します。これはC末端テールの保存された残基であり、Cskキナーゼによるリン酸化によって自己抑制型の閉鎖構造が維持されます。脱リン酸化またはpTyr529–SH2相互作用の置換により、Srcは活性化に向けてプライミングされます。
• Srcの発現は遍在していますが、血小板、ニューロン、破骨細胞では他の組織と比較して5〜200倍高いレベルで発現しています。皮膚における発現も検出されています (PubMed:22294297)。 関連文献: PMID:22294297
• 破骨細胞において、Srcは骨吸収に不可欠であり、PTK2B/PYK2複合体を介して作用し、CBLをリン酸化することでPI3Kシグナル伝達を活性化します (PubMed:14585963, PubMed:8755529)。また、シトクロムc酸化酵素を活性化することでエネルギー産生を促進します (PubMed:12615910)。 関連文献: PMID:14585963, PMID:8755529, PMID:12615910
• Srcは、RIG-Iを介したシグナル伝達を増強することで抗ウイルス自然免疫に関与し (PubMed:19419966)、YAP1-NOTCH経路を介してIL6駆動の上皮再生を媒介します (PubMed:25731159)。 関連文献: PMID:19419966, PMID:25731159

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はY529領域に対応する合成リン酸化ペプチドです。サンプル調製時にリン酸化が維持されるように（ホスファターゼ阻害剤を使用）、また特異性を検証するために非リン酸化コントロールを含めるようにしてください。
• ウェスタンブロットにおいて、Srcの予測分子量は約60 kDaであり、このサイズでバンドが観察されるはずです。非特異的結合を低減するために5% BSAブロッキングの使用を検討してください。
• IHC-PおよびIF/ICCにおいて、抗原賦活化法はリン酸化エピトープの保存に影響を与える可能性があるため、穏やかなクエン酸ベースの賦活化と低温処理を推奨します。
• Phospho-Src-Y529のELISA検出は、細胞ライセート中の部位特異的なリン酸化レベルを評価するために、総Src抗体と組み合わせて使用できます。
• 配列相同性に基づき、マウスおよびラットのSrcとの交差反応性が期待されます。関連するサンプルシステムで検証してください。

CamelBio：ワンストップの調達ブリッジ

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