POLR2A ウサギポリクローナル抗体（WB、IF/ICC、IHC-P、ELISA、ChIP用） - P24928

製品コア仕様・パラメータ

生物学的背景：POLR2Aの機能と局在

• DNA指向性RNAポリメラーゼIIサブユニットRPB1（POLR2A）は、RNAポリメラーゼIIの最大かつ触媒サブユニットであり、タンパク質コード遺伝子および多数の非コードRNAの転写に必須です。 関連文献: PMID:23748380 PMID:27193682 PMID:30190596 PMID:28108474
• 本ポリメラーゼは鋳型指向性のリボヌクレオチド付加反応を触媒し、活性部位はマグネシウムイオンによって配位されています。また、3'→5'エキソヌクレアーゼによる校正活性を有しています。 関連文献: PMID:8381534 PMID:9852112
• 52個のヘプタペプチド反復配列を含む特有のC末端ドメイン（CTD）が制御の拠点として機能し、Ser5のリン酸化はプロモーターエスケープを促進し、Ser2のリン酸化は伸長およびプレmRNAプロセッシングを促進します。 関連文献: PMID:24207025 PMID:26124092
• DNA依存的転写に加え、POLR2AはRNA依存性RNAポリメラーゼとしても機能し、内部鋳型を用いて非コードRNAを伸長することで、遺伝子サイレンシングに影響を与える可能性があります。
• 主に核内に局在し、細胞質および染色体上にも存在します。翻訳後修飾としては、アセチル化、メチル化、ユビキチン化、リン酸化が知られています。
• POLR2Aの変異は神経発達障害と関連しており、また本タンパク質はデルタ肝炎ウイルスなどのウイルスに標的され、ウイルスゲノムの複製に利用されます。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• ウエスタンブロットの場合、タンパク質の分子量が大きい（217 kDa）ため、6～8%のポリアクリルアミドゲルを使用し、効率的な転写を行ってください（例：10%メタノールを用いたウェット転写）。陽性コントロールとしてHeLaまたはHEK293細胞溶解液の使用を推奨します。
• IF/ICCおよびIHC-Pの場合、固定および抗原賦活化条件の最適化が必要です。細胞内の核内標的に対しては、Triton X-100による透過処理が必要となる場合があります。
• ChIPの場合、エピトープがN末端に位置することから天然型POLR2Aの検出に適していますが、陽性および陰性の標的遺伝子を用いた検証を推奨します。
• ポリクローナル抗体のため、ロット間の一致性は期待できますが、使用するアプリケーションでの検証を行ってください。

CamelBioについて：ワンストップ調達ブリッジ

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