WBおよびELISA用PTPRAウサギポリクローナル抗体 - P18433

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：PTPRAの機能と局在

• PTPRA（受容体型チロシンプロテインホスファターゼα）は、古典的プロテインチロシンホスファターゼファミリーに属し、細胞内ホスファターゼドメインを2つと、単一の膜貫通領域を有します。
• 主にインテグリンを介した接着斑の動態において機能し、インテグリンの結合時にアダプタータンパク質BCAR3、BCAR1、CRKを接着部位へリクルートします。
• このリクルートにより、SRCを介したBCAR1のリン酸化と、その下流におけるPAKキナーゼおよび低分子GTPアーゼRAC1、CDC42の活性化が促進され、細胞骨格の再編成が制御されます。
• PTPRAは主に細胞膜に局在し、細胞間結合部および接着斑に豊富に存在します。これは、接着を介したシグナル伝達における役割と一致しています。
• このタンパク質は選択的スプライシングを受け、糖鎖修飾されます。予測分子量は約90.7 kDaで、イムノブロットではしばしば91 kDaとして観察されます。
• 主な翻訳後修飾には複数残基のリン酸化が含まれ、3D構造、糖タンパク質、加水分解酵素、リファレンスプロテオームなどのキーワードに分類されています。
• 主にヒトで研究されていますが、マウスおよびラットでも保存された発現が認められるため、これらの種に対する交差反応性を示します。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原は細胞外ドメイン内のアミノ酸175～295をカバーしているため、抗体は糖鎖修飾型および前駆体型を検出する可能性があります。脱糖鎖処理によりバンドパターンが単純化される場合があります。
• ウエスタンブロットには、標準的な還元条件および7.5～10% SDS-PAGEゲルの使用を推奨します。シグナル強度を高めるには、膜画分または接着斑画分を濃縮してください。
• 91 kDa付近にバンドが予想されます。適切な分子量マーカーで分子量を確認し、わずかに異なるサイズの選択的スプライシングバリアントの可能性も考慮してください。
• ELISAでは、組換えPTPRAフラグメントまたは細胞溶解液を用い、捕捉試薬または検出試薬として抗体を滴定してください。PTPRA過剰発現細胞モデルとノックダウン細胞モデルを用いて特異性を検証してください。
• マウスおよびラットとの交差反応性は確認されていますが、エピトープの違いの可能性があるため、使用する細胞または組織系で必ず検証してください。

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