ウサギ抗ヒトCD22モノクローナル抗体（フローサイトメトリー用） - P20273

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：CD22の機能と局在

• CD22は、Siglec-2またはBリンパ球細胞接着分子（BL-CAM）としても知られ、シアル酸結合免疫グロブリン様レクチン（Siglec）ファミリーに属する膜貫通型糖タンパク質です。B細胞に高発現し、B細胞受容体（BCR）シグナル伝達を調節する抑制性共受容体として機能します。 関連文献： PMID:34330755、PMID:8627166
• BCRが活性化されると、CD22の免疫受容体チロシン依存性抑制モチーフ（ITIM）がSrcキナーゼLYNによってリン酸化され、タンパク質チロシンホスファターゼPTPN6（SHP-1）がリクルートされます。これによりカルシウム動員と細胞活性化が抑制され、B細胞応答が負に調節されるとともに、強いシグナル伝達下ではアポトーシスが誘導される可能性があります。 関連文献： PMID:8627166、PMID:20516366
• CD22は、CD45、IgM、CD22自体などの糖タンパク質上に存在するα2,6結合シアル酸残基にシス様式で特異的に結合し、他の細胞上のリガンドとのトランス相互作用を介して接着分子としても機能します。 関連文献： PMID:20172905
• このタンパク質は、B細胞の分化、抗原提示、骨髄への遊走において重要な役割を果たし、その発現は主に成熟Bリンパ球に限定されています。 関連文献： PMID:34330755、PMID:8627166
• CD22では選択的スプライシングが生じ、細胞外Ig様ドメインの数が異なるバリアントが産生されます。また、高度に糖鎖修飾およびリン酸化されており、これらの特徴がその機能と制御に寄与しています。
• 全長ヒトCD22は847アミノ酸からなり、計算上の分子量は約95.3 kDaです。N末端シグナルペプチド、7つのIg様C2型ドメイン、膜貫通ヘリックス、およびITIMとITIM様モチーフを含む細胞質尾部を有しています。

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• 使用されている免疫原（アミノ酸20～687を含む組換えタンパク質）は、ヒトCD22の細胞外領域全体をカバーし、すべてのIg様ドメインを含むため、生細胞上のネイティブタンパク質を確実に認識するのに役立ちます。
• あらかじめ標識された抗体（）であるため、この試薬は二次染色工程なしで直接フローサイトメトリーに使用できます。ただし、関連する陽性および陰性細胞株で抗体を滴定し、最適な使用濃度を決定してください。
• 一般的なヒトB細胞株（例：Raji、Daudi、Ramos）はCD22を高レベルで発現しており、陽性対照として使用できます。バックグラウンド結合を評価するため、アイソタイプ対照抗体の使用が推奨されます。
• 多色フローサイトメトリーパネルでは、蛍光補正対照を含め、B細胞の活性化状態によってCD22の発現が変化する可能性を考慮してください。

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