フローサイトメトリーおよびT細胞刺激用ウサギ抗ヒトCD28モノクローナル抗体 - P10747

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景：CD28の機能と局在

• CD28 (T細胞特異的表面糖タンパク質CD28、別名Tp44) は免疫グロブリンスーパーファミリーの一員であり、T細胞の活性化、増殖、生存に必須の共刺激受容体として機能します。
• CD28がそのリガンドCD80 (B7-1) またはCD86 (B7-2) と結合することは、T細胞受容体 (TCR) シグナルを増幅し、インターロイキン-2 (IL-2) の産生とT細胞の増殖を促進する重要な第二のシグナルを提供します。 関連参考文献: PMID:1650475, PMID:12196291, PMID:35397202
• CD28シグナル伝達はプロテインキナーゼC-シータ (PRKCQ) とアダプタータンパク質GRB2をリクルートし、PI3K/Akt依存性および非依存性経路を介してNF-κBを活性化し、T細胞内の遺伝子発現を調節します。 関連参考文献: PMID:24665965, PMID:21964608, PMID:7568038
• TCR/CD3およびCD40L共刺激と組み合わせて、CD28はTh2サイトカインIL-4およびIL-10の産生を増強し、液性免疫応答に寄与します。 関連参考文献: PMID:8617933
• CD28はCD40Lと相乗的に作用してNF-κBおよび下流キナーゼMAPK8とPAK2を活性化し、T細胞のエフェクター機能をさらに多様化させます。 関連参考文献: PMID:15067037
• CD28は主にT細胞および形質細胞の細胞表面に発現していますが、未熟なB細胞には存在しません。
• CD28タンパク質は、細胞外免疫グロブリン様ドメイン、単一の膜貫通ヘリックス、およびシグナル伝達モチーフを含む細胞質内尾部を持つ膜貫通型糖タンパク質です。翻訳後修飾には、ジスルフィド結合、グリコシル化、リン酸化が含まれます。
• 選択的スプライシングにより複数のCD28アイソフォームが生成され、異なるT細胞サブセットにおける共刺激シグナルを微調整している可能性があります。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原であるヒトCD28組換えタンパク質は、おそらく細胞外ドメインをカバーしているため、この抗体はフローサイトメトリーによる天然の細胞表面CD28の検出に適しています。ヒトT細胞株またはPBMCを用いて滴定し、最適な作業希釈率を決定してください。
• in vitro T細胞活性化には、共刺激シグナルを提供するために抗CD3抗体と組み合わせて使用してください。プレート結合型または架橋型のフォーマットはクラスタリングを増強する可能性があります。濃度と刺激時間を最適化するための予備実験を行ってください。
• この抗体を機能阻害または除去に使用する場合は、観察された効果の特異性を確認するために、組換えCD28タンパク質との前インキュベーションを行ってください。
• フローサイトメトリーのゲーティング戦略には、生死判別と適切なアイソタイプコントロールを含め、T細胞サブセット上のCD28発現を正確に定量する必要があります。
• 実験系における交差性を検証してください。この抗体はヒトCD28と反応すると報告されていますが、関連するサンプルコンテキストにおいてオフターゲット結合を除外する必要があります。

CamelBio：ワンストップ調達の架け橋

CamelBioは、診断メーカーおよび研究ラボ向けのIVD原材料調達を合理化します。当社の抗CD28モノクローナル抗体は、T細胞生物学および免疫腫瘍学研究向けに高品質な試薬を提供するという当社の取り組みを体現しています。サンドイッチ免疫測定法用の最適化された抗体ペアからバルクの補助試薬まで、コンセプトから臨床応用までの開発を加速します。