ウサギ抗ヒト CD326/EPCAM モノクローナル抗体（フローサイトメトリー用）- P16422

製品仕様とパラメータ

生物学的背景：上皮細胞接着分子の機能と局在

• 上皮細胞接着分子 (EPCAM)、別名 CD326 は、I型膜貫通型糖タンパク質であり、腫瘍関連カルシウムシグナルトランスデューサーファミリーの一員です。
• 粘膜上皮において、腸管上皮細胞 (IECs) と上皮内リンパ球 (IELs) の間のホモ親和性細胞接着を媒介し、粘膜感染に対する免疫学的バリアを提供します。
• EPCAM は、胚性幹細胞の増殖と分化において役割を果たし、FABP5、MYC、サイクリンAおよびEの発現をアップレギュレートします。
• このタンパク質は、その接着機能と一致して、細胞側面膜と密着結合に局在します。
• 未分化胚性幹細胞で高発現しており、分化に伴い急速に発現量が低下します。また、ほぼすべての上皮細胞膜に存在しますが、中胚葉性および神経細胞膜には存在しません。
• EPCAM は、腺癌の表面で頻繁に過剰発現しており、腫瘍抗原として、また癌診断・治療の標的として分類されています。
• 翻訳後修飾には、ジスルフィド結合の形成とグリコシル化が含まれ、このタンパク質はシグナルペプチドと膜貫通ヘリックスを含みます。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は細胞外ドメイン（アミノ酸 24–265）にまたがっているため、この抗体は細胞表面でアクセス可能なエピトープを標的としており、透過処理なしでのフローサイトメトリーに適しています。
• フローサイトメトリーでは、使用する実験系に最適な抗体濃度を決定するために滴定を行い、非特異的結合を評価するために適切なアイソタイプ対照を含めてください。
• EPCAM は表面抗原であるため、細胞生存性を維持するために低速遠心分離と穏やかな再懸濁を行ってください。細胞外エピトープを切断する可能性のある過度な酵素消化は避けてください。
• 蛍光色素が結合しているため、試料は光から保護し、光退色を最小限に抑えるために速やかに分析してください。
• 反応性は、MCF-7（乳癌）や HT-29（大腸癌）など、EPCAM を発現することが知られている上皮由来細胞株で検証してください。発現レベルは分化状態によって異なる場合があることに注意してください。
• EPCAM は腫瘍抗原であるため、混合試料において上皮細胞と非上皮細胞集団を区別するゲーティング戦略を検討してください。

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