ウサギ抗ヒトCD335/NKp46 モノクローナル抗体 IF/ICC・FC用 - O76036

製品の主な仕様・パラメータ

生物学的背景：自然細胞傷害性誘発受容体1 (CD335/NKp46)の機能と局在

• 本タンパク質は、CD335、LY94、NKp46としても知られる自然細胞傷害性誘発受容体(NCR1)です。免疫グロブリンスーパーファミリーに分類され、選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが存在します。
• 活性化されたナチュラルキラー(NK)細胞の腫瘍細胞溶解能を高める、細胞傷害性活性化受容体として機能します。
• CD335/NKp46は静止期および活性化NK細胞の両方に選択的に発現しており、NK細胞を同定するための特異的マーカーとして機能します。
• 本受容体はI型膜貫通糖タンパク質で細胞膜上に局在し、細胞外領域に2つの免疫グロブリン様ドメインを持ちます。
• 翻訳後修飾としてN結合型グリコシル化およびジスルフィド結合形成が生じており、構造の安定性に寄与しています。
• ヒトではNCR1遺伝子は19番染色体に位置し、約34.5 kDaの分子量を持つタンパク質をコードします。グリコシル化によりバンドの位置が変化するため、実測では21～34 kDaの範囲で観察されることがあります。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 免疫原はヒトCD335/NKp46の細胞外ドメイン(アミノ酸22～254番)であり、細胞表面に露出している領域です。この設計により、天然型の受容体を検出するのに適しています。
• 免疫蛍光法(IF/ICC)では、アセトン固定またはパラホルムアルデヒド固定した細胞標本の使用を推奨します。また、バックグラウンド評価のため、一次抗体を含まない陰性対照を設定してください。
• フローサイトメトリー(FC)では、が直接結合しているため二次抗体は不要です。本蛍光色素はAlexa Fluor 594と励起/放出特性が類似しているため、ご使用の装置のレーザー・フィルター設定と適合することをご確認ください。
• 陽性対照にはCD335/NKp46発現細胞またはNK細胞株を使用してください。新鮮単離したヒトPBMCは、内在性CD335/NKp46を発現するNK細胞の供給源として利用できます。
• グリコシル化の不均一性により、ウェスタンブロッティングでは複数のバンドが出現することがあります。WBを実施する場合は、還元・煮沸処理によってエピトープが変性する可能性がある点にご留意ください。

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