ラビット抗ヒトCD34モノクローナル抗体（IF/ICCおよびフローサイトメトリー用）- P28906

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：CD34の機能と局在

• CD34遺伝子にコードされる造血前駆細胞抗原CD34は、造血幹細胞および前駆細胞の確立されたマーカーであり、細血管の内皮細胞もマーキングします。
• 代替スプライシングにより複数のアイソフォームが生成されます。代表的なアイソフォームの計算分子量は約41 kDa (UniProt: 40716 Da) ですが、翻訳後処理やアイソフォームの違いにより、より短い35 kDaのバリアントが生じる可能性があります。
• CD34はシングルパス型I膜貫通糖タンパク質であり、おそらく接着分子として機能し、初期造血において幹細胞の骨髄細胞外マトリックスまたは間質細胞への接着を媒介します。
• 系譜特異的な糖鎖の足場として機能し、セレクチンに炭水化物リガンドを提示して、細胞間相互作用を促進する可能性があります。
• 細胞内局在は主に細胞膜であり、細胞外接着およびシグナル伝達におけるその役割と一致しています。
• このタンパク質は、N結合およびO結合グリコシル化（糖タンパク質）やリン酸化を含む広範な翻訳後修飾を受けており、これらがその機能や結合特性を調節している可能性があります。
• 発現は高度に選択的です。CD34は、骨髄および末梢血の造血前駆細胞、ならびに多くの組織の細血管内皮に存在します。
• 細胞外領域（免疫原として使用されたアミノ酸170–290を含む）には複数のグリコシル化部位が含まれており、細胞表面に露出しているため、抗体ベースの検出のアクセス可能なターゲットとなります。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原はヒトCD34の細胞外領域（aa 170–290）に対応しており、天然の表面抗原を認識することが保証されます。この抗体は、IF/ICCおよびフローサイトメトリアプリケーションについて検証されています。
• 免疫蛍光染色では、細胞を適切に固定および透過処理してください。表面CD34を検出する場合は、非透過処理プロトコルの使用を検討してください。
• フローサイトメトリーでは、非特異的結合を最小限に抑えるために、適切なアイソタイプ対照およびFc受容体ブロッキングステップを含めてください。細胞系に最適な濃度を決定するために、抗体を滴定してください。
• CD34の発現は特定の細胞種に限定されています。特異性を確認するために、特性の明らかな陽性対照（KG-1a細胞、HUVEC、またはCD34+造血前駆細胞など）と陰性対照（リンパ球、成熟血液細胞など）を使用してください。
• このコンジュゲートはIF/ICCおよびFC用に設計されていますが、他のアプリケーション（IHC、WBなど）を検討する場合は、それらの条件下で抗体を検証し、抗原コンフォメーションの潜在的な違いを考慮してください。

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