フローサイトメトリー用 ウサギ抗ヒトCD52モノクローナル抗体 - P31358

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：CD52の機能と局在

• CD52は、CAMPATH-1抗原、HE5、またはCDW52としても知られる、GPIアンカー型の非常に小さな糖タンパク質です。シグナルペプチドの切断とGPI付加後の成熟ペプチドは、わずか12アミノ酸です。
• GPIアンカー型膜タンパク質であるCD52は細胞膜に局在し、グリコシルホスファチジルイノシトール（GPI）アンカーを介して結合しており、膜貫通ドメインを持ちません。
• CD52はリンパ球、単球、その他の免疫細胞に高発現していますが、精巣上体分泌タンパク質E5（HE5）として男性生殖管にも存在します。
• CD52は高度にグリコシル化されており、GPIアンカーとN結合型糖鎖がその糖鎖提示機能に寄与し、細胞間相互作用のために細胞表面で糖鎖を配向させている可能性があります。
• 正確な機能は未だ明らかではありませんが、CD52は細胞表面で糖鎖部分を運搬および配向させる役割を担い、免疫調節に関与する可能性があります。
• CD52抗原の分子量は約6.6 kDa（アミノ酸配列から算出）ですが、グリコシル化により電気泳動上はしばしばそれより高い位置に移動します。本抗体はN末端領域（1～61）を標的とします。
• CD52は治療用モノクローナル抗体アレムツズマブ（Campath-1H）の標的であり、慢性リンパ性白血病および多発性硬化症の治療に使用されています。
• UniProtにおけるキーワードには、3D構造、細胞膜、糖タンパク質、GPIアンカー、リポタンパク質、膜、リファレンスプロテオーム、シグナルが含まれます。

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• この結合抗体は、生きたヒト細胞の直接フローサイトメトリーに適しています。使用するアッセイ系において、染色条件（抗体濃度、インキュベーション時間、温度）をバリデーションしてください。
• CD52は表面抗原です。GPIアンカーを損なう可能性のある透過処理工程は避けてください。穏やかな細胞操作と標準的な表面染色プロトコルを使用してください。
• 免疫原はN末端の細胞外領域（アミノ酸1～61）に対応しており、成熟した細胞表面型を確実に認識します。
• 末梢血リンパ球および単球で強い発現が予想されます。陽性対照として健常ドナー由来PBMCの使用を検討してください。
• 定量フローサイトメトリーでは、適切なアイソタイプコントロールを含め、滴定を行って最適な抗体濃度を決定してください。
• CD52は小分子でGPI結合型であるため、細胞表面から遊離する可能性があります。最適な検出のため、新鮮なサンプルを直ちに処理することを推奨します。

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