フローサイトメトリー用 標識 ウサギ抗ヒトCD55 モノクローナル抗体 - P08174

製品の中核仕様とパラメータ

生物学的背景：CD55（補体制御因子DAF）の機能と局在

• CD55は、減衰加速因子（DAF）としても知られ、グリコシルホスファチジルイノシトール（GPI）アンカー型膜タンパク質であり、補体制御因子（RCA）ファミリーに属します。
• 細胞表面に沈着したC4bおよびC3bフラグメントを認識し、それらがC2および因子Bの変換を触媒する能力を妨害することで、C4b2aおよびC3bBb増幅転換酵素の形成を防ぎます。 関連参考文献: PMID:7525274
• CD55は、C3およびC5転換酵素の組み立てを阻害し不安定化させることで、自己細胞を補体介在性の溶解および組織損傷から保護します。 関連参考文献: PMID:28657829
• 補体制御に加えて、CD55は、コクサッキーウイルスA21、コクサッキーウイルスB1、B3、B5、ヒトエンテロウイルス70およびD68、エコーウイルス6、7、11、12、20、21を含む多様なピコルナウイルスの細胞受容体として機能します。
• 血漿補体タンパク質に接触するほぼすべての細胞の細胞膜、および細胞外区画を裏打ちする上皮細胞に発現しています。体液中および細胞外マトリックスには可溶型も存在します。
• このタンパク質は、リガンド結合に必須な複数のN結合型グリコシル化部位と4つのN末端スシ（CCP）ドメインを含みます。選択的スプライシングにより、GPIアンカー型と分泌型のバリアントが生成されます。
• 臨床的には、CD55の変異はCHAPLE症候群（補体過剰活性化、血管性血栓症、蛋白漏出性腸症）と関連しており、この分子はクロマー血液型抗原を担っています。
• 成熟ポリペプチドの予測分子量は約41 kDaですが、高度なグリコシル化のため、ウェスタンブロッティングでは39 kDaから59 kDaの範囲で不均一なバンドパターンを示します。

実験ガイドラインと技術的ヒント

• 免疫原は全細胞外ドメイン（アミノ酸35–353）をカバーしているため、この抗体は生細胞上の天然型CD55に結合することが示唆されます。表面検出のためには、非透過化条件下での染色を検証してください。
• フローサイトメトリーでは、ヒト末梢血単核球またはCD55トランスフェクト細胞株を用いて、抗体を0.1–5 µg/mLの範囲で滴定し、最適濃度を決定してください。
• 非特異的結合（特にFcγR発現の高いサンプル）を最小限に抑えるために、適切なアイソタイプコントロールおよびFc受容体ブロッキング試薬を含めてください。
• CD55は膜から脱落するため、可溶型を調査する場合は、一次細胞と対応する培養上清の両方を染色することを検討してください。
• 特定の実験系での交差反応性を確認してください。この抗体はヒトCD55に反応すると報告されていますが、ヒト以外の霊長類や齧歯類モデルでの性能は個別に確認する必要があります。

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