ウサギ抗ヒト CLEC12A/CD371 モノクローナル抗体（フローサイトメトリー用） - Q5QGZ9

製品の中核的仕様およびパラメータ

生物学的背景：CLEC12Aの機能と局在

• CLEC12A (CD371, CLL-1, MICL) は、C型レクチンファミリーに属するシングルパスII型膜貫通型受容体です。選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが産生されます。
• 骨髄系抑制性受容体として機能します。リガンド結合により、そのITIMモチーフがリン酸化され、チロシンタンパク質ホスファターゼ PTPN6 および PTPN11 をリクルートし、SYKを介した活性化シグナルを減衰させることで、サイトカイン産生や脱顆粒などの骨髄系細胞応答を抑制します。 関連文献: PMID:14739280, PMID:16239426, PMID:34234773
• 多様なリガンドに対するパターン認識受容体として作用します：好中球細胞外トラップ (NETs) 中のDNA、尿酸一ナトリウム結晶、マラリアヘモゾインやマイコバクテリアのミコール酸などの病原体関連分子を認識し、抗炎症フィードバックや宿主防御に関与します。 関連文献: PMID:38367667, PMID:38386511, PMID:39143217, PMID:31269448, PMID:36542980
• ナチュラルキラー (NK) 細胞の細胞傷害活性を抑制し、IL-10依存的に樹状細胞の成熟を抑制することで、免疫恒常性の維持に寄与します。 関連文献: PMID:15238421, PMID:16239426
• 主に細胞膜に局在します。
• リンパ組織および自然免疫/獲得免疫細胞（NK細胞、T細胞、樹状細胞、単球、マクロファージなど）で優先的に発現します。タンパク質レベルでは、脾臓のマクロファージに富む赤脾髄やリンパ節で検出されます。 関連文献: PMID:14739280, PMID:15238421, PMID:15548716, PMID:16239426, PMID:16838277
• 翻訳後修飾にはN結合型グリコシル化とリン酸化が含まれます。細胞外ドメインには、構造的完全性に必須な保存されたジスルフィド結合が含まれます。

実験ガイドラインおよび技術的ヒント

• 使用した免疫原は、ヒトCLEC12Aの細胞外ドメイン (aa 65-265) に対応しており、C型レクチンドメインを含み、生細胞上の天然受容体を認識する抗体の産生に十分です。
• この標識抗体は、二次抗体を必要としない直接フローサイトメトリー (FC) 用に最適化されています。使用する細胞タイプと染色条件に最適な作業濃度を決定するため、抗体の希釈系列検討をお勧めします。
• CLEC12Aの表面染色を行う場合は、細胞を回収し、FACSバッファー（1〜2% FBSまたはBSAを含むPBS）で洗浄します。蛍光色素標識抗体と2〜8°C、20〜30分間、遮光下でインキュベートします。
• 非特異的結合を最小限に抑えるため、適切なアイソタイプコントロールとFc受容体ブロッキング試薬を含めてください。特に骨髄系細胞集団では重要です。
• 染色後はできるだけ早くデータ取得を行ってください。やむを得ず遅延する場合は、洗浄後パラホルムアルデヒドで細胞を固定し、遮光保護してください。
• 抗体の凍結融解サイクルの繰り返しは避けてください。標識抗体は希釈せずに2〜8°Cで保存し、長時間の光暴露から保護してください。

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