フローサイトメトリー用ウサギ抗ヒトHER2/ErbB2モノクローナル抗体 - P04626

製品の主な仕様・パラメータ

生物学的背景：HER2/ErbB2の機能と局在

• HER2/ErbB2は受容体型チロシンタンパク質キナーゼで、細胞表面受容体複合体内で機能し、リガンド結合には共受容体を必要とします。ニューレグリンはHER2と直接相互作用しませんが、HER2はニューレグリン受容体複合体の必須構成要素です。
• 本タンパク質はMEMO1-RHOA-DIAPH1シグナル伝達経路を介して微小管の伸長と安定化を調節します。この経路はGSK3Bを阻害し、微小管捕捉に重要なAPCおよびMACF1の膜局在化を促進します。
• 核内では、HER2は転写調節因子として機能します：PTGS2/COX-2プロモーターに結合して転写を活性化し、STAT3およびSRCと協調してCDKN1Aの転写活性化に関与します。
• RNAポリメラーゼIによるrRNA遺伝子の転写にも関与し、それによってタンパク質合成と細胞増殖を促進します。
• 亜細胞レベルでは、HER2は細胞膜、膜突起、初期エンドソーム、細胞質（核周辺領域）、核に局在し、シグナル伝達と転写調節の二重の役割を反映しています。
• 原発性乳がん、小腸がん、食道がん、腎臓がん、口腔がんを含む様々な腫瘍組織で発現が認められており、その発がん的意義が強調されています。
• 主要な構造的特徴として、シグナルペプチド、大きな細胞外ドメイン、1つの膜貫通ヘリックス、細胞内チロシンキナーゼドメインがあります。翻訳後修飾にはリン酸化、グリコシル化、ジスルフィド結合形成が含まれます。

実験ガイダンスと技術的なヒント

• 本抗体はフローサイトメトリー（FC）に適しており、ヒトHER2の細胞外ドメインを認識します。陽性対照には適切なHER2陽性細胞株（例：SK-BR-3、BT-474）を使用し、陰性対照にはHER2陰性細胞株（例：MCF-7）を使用してください。
• 細胞表面染色では、細胞外エピトープを保護するため、固定・透過処理を行わずに生細胞を回収し染色を実施してください。非特異的結合を低減するため、アイソタイプ対照とFcブロッキングを含めてください。
• ご使用のアッセイ条件に最適な濃度を決定するため、抗体の滴定を行ってください。一般的な開始濃度は1テストあたり0.1～1 µgの範囲です。
• 免疫原がアミノ酸23～652をカバーしているため、本抗体はこの領域を欠くアイソフォームやN末端が切断されたアイソフォームを検出できない可能性があります。代替アイソフォームを使用する場合は、対象の細胞系での発現を検証してください。
• 蛍光安定性を維持するため、複合体を長時間の光照射から保護してください。推奨される方法で抗体を保管し、凍結融解の繰り返しを避けてください。

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