フローサイトメトリー用 ウサギ抗ヒトIgG（Fc）モノクローナル抗体 - P01857

製品コア仕様・パラメータ

生物学的背景：IgG（Fc）の機能と局在

• 本抗体の標的は、IGHG1遺伝子にコードされるヒト免疫グロブリンガンマ1重鎖（IgG1）の定常領域（Fc）であり、成熟タンパク質のアミノ酸100～330番に相当します（UniProt P01857）。この領域はFc受容体や補体との相互作用を介してエフェクター機能を媒介します。
• 免疫グロブリン重鎖は適応免疫に不可欠な分子です：膜結合型IgはB細胞受容体として機能し、分泌型抗体は病原体を中和します。IgG1のFc領域は特に、抗体依存性細胞傷害、補体依存性細胞傷害、食作用を誘発します（PubMed:17576170、PubMed:20176268、PubMed:22158414）。 関連参考文献: PMID:17576170 PMID:20176268 PMID:22158414
• IgG1はジスルフィド結合で連結された2本の同一重鎖と2本の軽鎖から構成され、各重鎖は1つの可変ドメイン（V、D、Jセグメントにコードされる）と3つの定常ドメイン（CH1、CH2、CH3）を持ちます。CH2ドメインとCH3ドメインが本抗体の標的であるFc断片を形成します。
• IGHG1遺伝子は14番染色体上の免疫グロブリン重鎖遺伝子座の一部であり、活性化B細胞ではIgM/IgDからIgG1へのクラススイッチ組換えが生じ、抗体レパートリーが形成されます。
• IgG1はヒト血清中に最も多く存在する抗体アイソタイプであり、長期的な液性免疫に不可欠で、治療用抗体の骨格としても頻繁に用いられます。
• 亜細胞局在：IgG1重鎖は抗体として分泌されるか、膜結合型免疫グロブリン（膜貫通型）としてB細胞表面に提示されます。
• 翻訳後修飾として、ジスルフィド結合形成と保存されたCH2ドメインでのN-グリコシル化が生じます。これらはFc受容体結合と安定性に必須です。
• キーワード: 適応免疫、分泌、細胞膜、糖タンパク質、免疫グロブリンドメイン、ジスルフィド結合。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 本抗体は、光安定性に優れた蛍光色素で標識されています。励起/蛍光極大は約590/617 nmで、標準的なフローサイトメーターと互換性があります。測定時は適切な機器設定と補正を行ってください。
• フローサイトメトリーで使用する際は、ヒトIgGを発現する陽性・陰性対照細胞（例：ヒトB細胞または膜IgGを発現する細胞株）を用いて抗体を滴定し、最適な染色濃度を決定してください（通常は10^6細胞あたり0.5～5 µgです）。
• 本抗体はFc領域を認識するため、血清または培地中の遊離IgGに結合する可能性があります。バックグラウンドを低減するため、細胞を十分に洗浄してください。
• 本クローンは研究用途において、ヒトB細胞の表面IgGの検出、またはIgGでコーティングされた粒子や免疫複合体の同定に使用できます。
• Fcエピトープが変性する可能性のある過酷な固定・透過処理は避けてください。一般的には穏やかなパラホルムアルデヒド固定（1～4%）で問題なく使用できます。
• FcγRを高発現する細胞を染色する際は、非特異的結合を防ぐためにFc受容体ブロッキング試薬を使用してください。
• Fc領域の配列は他のIgGサブクラス（IgG2、IgG3、IgG4）と相同性が高いため、必要に応じて他のサブクラスとの交差反応性を検証することを推奨します。

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