フローサイトメトリー（細胞内）用 ウサギ抗ヒト IL-6R/CD126 モノクローナル抗体 - P08887

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：IL-6R/CD126 の機能と局在

• インターロイキン 6 受容体 α サブユニット（IL-6R、CD126/gp80）は、膜結合型および選択的スプライシングとタンパク質分解性シェディングによって生じる可溶性アイソフォーム（sIL6R）として存在する膜貫通型糖タンパク質です。
  関連文献： PMID:28060820

• 膜結合型 IL-6R は低親和性でインターロイキン 6（IL-6）に結合します。シグナル伝達には gp130 共受容体との会合が必要であり、JAK/STAT、MAPK などの経路を活性化して、免疫応答、急性期反応、造血を調節します。膜結合型 IL-6R を介するクラシックシグナル伝達は、主に再生促進性および抗炎症性であり、その発現は主として肝細胞と一部の白血球サブセットに限られています。
  関連文献： PMID:28265003、PMID:30995492、PMID:31235509

• 可溶性 IL-6R（sIL6R）は、IL-6:sIL6R 複合体を形成して膜結合型 IL-6R を欠く細胞上の gp130 に結合することでアゴニストとして作用し、IL-6 トランスシグナル伝達を可能にします。トランスシグナル伝達は炎症促進性であり、慢性炎症性疾患に関与し、VEGF 産生を誘導するとともに、中枢神経系におけるエネルギーおよびグルコース恒常性を調節します。
  関連文献： PMID:21990364、PMID:12794819

• クラスターシグナル伝達では、ある細胞上の膜結合型 IL-6:IL-6R 複合体が隣接細胞上の gp130 を活性化します。この方式は、樹状細胞がナイーブ CD4⁺ T 細胞の Th17 分化を促進する際に利用されます。

• IL-6R は末梢血単核細胞および肝細胞に発現し、sIL6R は血清および尿中に低濃度で検出されます。血漿中 sIL6R の約 1～20% は選択的スプライシングに由来します。
  関連文献： PMID:28060820

• 細胞外領域には、ジスルフィド結合によって安定化された免疫グロブリン様ドメインおよびサイトカイン受容体相同性モジュールが含まれます。このタンパク質は N-グリコシル化を受け、リガンド結合および受容体の安定性に重要な役割を果たします。

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• 免疫原は細胞外ドメイン（aa 20～358）にまたがるため、この抗体は膜結合型 IL-6R と sIL6R の両方を認識する可能性があります。細胞内フローサイトメトリーでは、可溶性型によるバックグラウンドを最小限に抑えながら細胞内受容体プールを検出できるよう、固定および透過化条件を最適化してください。
• 染色の特異性を実験系で確認するため、IL-6R ノックアウトまたはノックダウン対照を含めることを推奨します。
• 直接結合体は二次抗体の工程を不要にし、アッセイ時間を短縮します。ただし、特定の細胞モデルで最適なシグナル対ノイズ比を得るため、滴定を行うことを推奨します。
• sIL6R は培養上清または体液中に存在する可能性があるため、未結合の可溶性受容体–抗体複合体を除去するため、染色後に十分な洗浄を行ってください。

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