IF/ICCおよび細胞内FC用 ウサギ抗ヒトLAMP2モノクローナル抗体 - P13473

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：LAMP2の機能と局在

• LAMP2（リソソーム関連膜糖タンパク質2）は、CD107b、LAMP-2、LGP-96、LGP110としても知られ、LAMP2遺伝子にコードされる高度に糖鎖修飾された膜貫通タンパク質です。選択的スプライシングにより、LAMP-2A、LAMP-2B、LAMP-2Cという3つの主要アイソフォームが産生されます。これらは細胞質側のテールが異なり、組織分布も異なります。
• 主要なリソソーム膜糖タンパク質として、LAMP2はプロトンチャネルTMEM175の直接的な阻害因子として作用し、リソソームの酸性化および加水分解酵素の最適な活性を促進することで、リソソームの生合成とpH調節に不可欠な役割を果たします。 関連文献： PMID:37390818
• LAMP2は、選択的分解経路であるシャペロン介在性オートファジー（CMA）の中心的なメディエーターです。LAMP2は、GAPDH、GPX4、NLRP3、MLLT11などの標的タンパク質をリソソーム膜へ輸送する細胞質シャペロン複合体（HSPA8/HSC70など）に結合し、受容体として基質をリソソーム内へ移行させて分解します。 関連文献： PMID:11082038、PMID:18644871、PMID:24880125、PMID:36586411
• LAMP2は、マクロオートファジーにおけるオートファゴソームとリソソームの融合に必要です。LAMP2を欠損した細胞では、オートファゴソーム上にSTX17が蓄積せず、融合が阻害され、オートファジー貨物の分解が損なわれます。 関連文献： PMID:27628032
• LAMP2は、リソソームによる分解と、それに続く新生MHCクラスII分子への抗原ペプチドのローディングを可能にすることで、MHCクラスIIを介した外因性抗原の効率的な提示を促進しますが、内因性抗原の提示には必須ではありません。 関連文献： PMID:15894275、PMID:20518820
• 細胞内では、LAMP2は主にリソソーム膜に局在しますが、エンドソーム、オートファゴソーム、細胞膜にも存在し、エンドリソソーム経路およびオートファジー経路における動的な輸送と機能を反映しています。
• アイソフォーム特異的な発現パターンが認められます。LAMP-2Aは胎盤、肺、肝臓で高発現する一方、LAMP-2BおよびLAMP-2Cは、脾臓、胸腺、脳、小腸などの組織で異なる分布を示します。 関連文献： PMID:26856698、PMID:7488019
• 特に、LAMP2は糖原病の一種であるDanon病と関連しており、その研究には選択的スプライシング、オートファジー、ジスルフィド結合、糖タンパク質、膜貫通ヘリックスなどのキーワードが含まれます。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はヒトLAMP2のアミノ酸29～375に相当し、すべてのアイソフォームに共通する大きな内腔ドメインをカバーしています。この広範なカバレッジにより、配列相同性が認められる複数のLAMP2バリアントを検出できます。
• 本抗体はに直接結合しているため、二次抗体を必要とせず、免疫蛍光（IF/ICC）および細胞内フローサイトメトリー（FC細胞内）の1ステップ染色が可能です。
• 細胞内フローサイトメトリーでは、固定および透過処理が必要です。標準的なプロトコル（例：4% PFA固定後、サポニンまたはTriton X-100で透過処理）を使用し、使用する細胞種に応じてインキュベーション時間と抗体濃度を最適化してください。
• 関連する生物学的システム（ヒト）で抗体性能を検証し、特異性を確認するために、適切な陽性および陰性対照（例：野生型細胞とLAMP2ノックダウン細胞）を含めてください。
• LAMP2は高度に糖鎖修飾され、複数のアイソフォームとして存在するため、ウェスタンブロットでの見かけの分子量は予測値の44～45 kDaと異なる場合があります。WBでの試験は記載されていないため、必要に応じて、検出能を確認するための予備実験を検討してください。

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