フローサイトメトリー用 ウサギ抗ヒトNectin-4 モノクローナル抗体 - Q96NY8

製品の主な仕様・パラメータ

生物学的背景：Nectin-4の機能と局在

• Nectin-4はPVRL4、LNIR、PRR4としても知られる免疫グロブリンスーパーファミリーの受容体で、ヒトではNECTIN4遺伝子によってコードされています（Gene ID 81607）。
• トランスホモフィリック相互作用およびヘテロフィリック相互作用を介して細胞接着分子として機能し、特にNECTIN1と特異的に相互作用します。αヘルペスウイルスの侵入受容体としては働きません。
• Nectin-4はネクチンファミリーのメンバーです。ネクチンファミリーにはネクチン1から4までの4種類のメンバーがあり、いずれも3つの細胞外免疫グロブリンドメイン、1つの膜貫通ドメイン、細胞質テールを持っています。
• 亜細胞レベルでは、Nectin-4は細胞膜、接着結合などの細胞結合に局在するほか、可溶性の分泌型も検出されています。
• 翻訳後修飾としてグリコシル化やジスルフィド結合の形成があり、これらが構造的安定性と機能に寄与しています。
• Nectin-4は主に胎盤で発現しており、正常な乳腺上皮では検出されない一方、乳癌で発現が認められることから、腫瘍生物学における役割が示唆されています。
• 重要な点として、Nectin-4は麻疹ウイルスの細胞受容体として機能し、ウイルスが宿主細胞に侵入するのを促進します。
• 計算上の分子量は約55 kDaですが、選択的スプライシングにより24 kDaなどのアイソフォームが存在する可能性があります。

実験ガイダンスと技術的なヒント

• 本抗体の免疫原はN末端側細胞外領域（アミノ酸32～146番）に対応し、受容体相互作用に重要な1番目のIg様ドメインを含んでいます。この設計により表面露出エピトープが標的となっているため、生細胞上の天然型Nectin-4をフローサイトメトリーで検出するのに適しています。
• 本抗体はで直接標識されているため、二次抗体は不要です。非特異的結合を最小限に抑え、フローサイトメトリーの染色プロトコルを簡素化できます。
• 最適な性能を得るため、使用する細胞株と実験系に合わせて抗体濃度の滴定を行ってください。1×10⁶個の細胞に対して1:20～1:100の希釈倍率から試験することを推奨しますが、実際の最適希釈倍率は実験的に決定してください。
• Nectin-4は組織特異性（胎盤、乳癌）や亜細胞局在（膜、分泌型）が報告されているため、胎盤組織、乳癌細胞株（MCF-7、T47Dなど）を陽性コントロールとして使用し、正常乳腺上皮やノックアウト/ノックダウンモデルを陰性コントロールとして用いて、染色特異性を検証してください。
• Nectin-4は分泌型として剥離されることがあるため、上清や血清などの実験条件では、本抗体が可溶性Nectin-4を検出する可能性があります。細胞培養上清由来サンプルのフローサイトメトリーデータを解析する際はこの点にご留意ください。
• 麻疹ウイルス研究において、本抗体はウイルス-宿主相互作用の研究でNectin-4の発現を評価するために使用できますが、ウイルス結合や細胞侵入時にエピトープがマスクされないことを確認してください。
• 報告されている分子量バンド（24 kDaと55 kDa）は選択的アイソフォームに対応しています。ウエスタンブロットなどの直交検証を行う場合、還元条件下でこれらのサイズが観察される可能性があります。

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