ウサギ抗ヒト リン酸化-PI3KP85α-Y467+P85β-Y464+P55γ-Y199 モノクローナル抗体 - P27986 / O00459 / Q92569

中核製品仕様およびパラメータ

生物学的背景: PI3K 調節サブユニット (p85α/p85β/p55γ) の機能と局在

• PIK3R1はPI3Kのp85α調節サブユニットをコードし、選択的スプライシングにより複数のアイソフォーム（p85α、p55α、p50α）として存在します。p85αアイソフォームは全長タンパク質であり、短縮アイソフォームはN末端SH3ドメインおよびBH相同領域を欠いています。本抗体は、3つの遺伝子産物PIK3R1 (p85α)、PIK3R2 (p85β)、PIK3R3 (p55γ)のリン酸化型を認識します。
• 調節サブユニットは、そのSH2ドメインを介して活性化（リン酸化）されたプロテインチロシンキナーゼに結合し、p110触媒サブユニットを細胞膜へリクルートするアダプター分子として機能し、PI3Kシグナル伝達を活性化します。 関連文献: PMID:17626883 PMID:19805105 PMID:7518429
• PI3K調節サブユニットは、骨格筋や肝臓などのインスリン感受性組織における、インスリン刺激によるグルコース取り込みとグリコーゲン合成に必須です。また、増殖因子受容体（FGFR1-4、PDGFR、KIT）やインテグリンITGB2の下流シグナル伝達も仲介します。 関連文献: PMID:17626883 PMID:7518429
• p85αは、小胞体（ER）ストレスおよび/またはインスリン依存性の様式で、特に肝臓における代謝過負荷時に、XBP1アイソフォーム2の核内移行を促進することで、細胞のERストレス応答を調節し、それによりグルコース耐性を改善します。 関連文献: PMID:20348923
• p85α/p85β/p55γサブユニットは主に細胞質に存在し、p110触媒サブユニットと会合しています。活性化時には、細胞膜へリクルートされ、PI3Kホロ酵素をその脂質基質の近くに局在させます。
• 翻訳後修飾には、受容体型および非受容体型チロシンキナーゼによる複数のチロシン残基（例：p85αのY467、p85βのY464、p55γのY199）でのリン酸化が含まれ、これはPI3K活性とタンパク質-タンパク質相互作用の調節に重要です。その他の修飾には、アセチル化やユビキチン化があります。
• PIK3R1のアイソフォーム2 (p55α)は、骨格筋と脳で高発現し、腎臓と心筋では低発現しています。タンパク質レベルでは、アイソフォーム2とアイソフォーム4 (p50α)の両方が骨格筋で検出されており、インスリンシグナル伝達と代謝における組織特異的な役割が示唆されています。
• PIK3R1の変異は、SHORT症候群（低身長、過伸展性、眼窩陥凹、Rieger異常、歯の萌出遅延）やその他の成長関連疾患と関連しており、発生およびインスリン様増殖因子シグナル伝達におけるその役割を強調しています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトp85αのY467を含む合成リン酸化ペプチドです。実験系でリン酸化が保持されるようにしてください—サンプル調製中にホスファターゼ阻害剤を使用し、リン酸化エピトープの検出を高めるために刺激条件（例：インスリン、増殖因子）を考慮してください。
• 本抗体は、細胞内フローサイトメトリー（FC）で検証済みです。最適な染色のためには、リン酸化特異的検出と互換性のあるプロトコル（例：ホルムアルデヒド固定後、メタノールによる透過処理）を使用して細胞を固定・透過処理してください。使用する細胞タイプと処理条件に最適な希釈率を決定するために、抗体の滴定を行ってください。
• 本抗体はp85αのリン酸化Y467、p85βのリン酸化Y464、p55γのリン酸化Y199を認識するため、観察される分子量範囲は変動する可能性があります。ウェスタンブロッティング（試みる場合）では、42-54 kDa（短縮アイソフォーム用）および81-84 kDa（全長p85α/p85β用）の間にバンドが現れる可能性があります。適切な陽性対照（例：インスリン刺激したHepG2またはHeLa細胞）を泳動し、ホスファターゼ処理を用いて特異性を確認してください。
• シグナル伝達研究においてリン酸化比率を評価するために、本抗体を総PI3K調節サブユニット抗体と組み合わせて使用することを検討してください。定量的FCでは、蛍光色素が使用するサイトメーターの設定と互換性があること、および多重染色を行う場合は補正用対照が含まれていることを確認してください。
• 交差反応性はヒトに対して報告されています。他の種を使用する場合は、使用前に配列アラインメントを用いて標的リン酸化部位の保存性を検証してください。

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