ラビット抗ヒトSiglec-8 モノクローナル抗体（FC用） - Q9NYZ4

製品の中核仕様とパラメータ

生物学的背景：Siglec-8の機能と局在

• Siglec-8（シアル酸結合性免疫グロブリン様レクチン8）は、シアルアドヘシンファミリーレクチンの一員であり、シアルアドヘシンファミリー分子2 (SAF-2)とも呼ばれます。
• これは、シアル酸依存性の血球への結合を媒介すると推定される接着分子です。 関連参考文献: PMID:10625619 PMID:10856141
• Siglec-8はα-2,3結合型シアル酸を優先的に結合し、次いでα-2,6結合型シアル酸を結合します。同じ細胞表面上でのシス相互作用により結合部位がマスクされる可能性があります。 関連参考文献: PMID:10625619
• 本分子は、末端のN-アセチルノイラミン酸（シアル酸）とその下流の6-O-硫酸化ガラクトースを認識し、Gal-6-硫酸化シアルルルイスXグリカンエピトープに対する親和性を示します。 関連参考文献: PMID:27357658
• このタンパク質は、免疫グロブリン様ドメイン、シグナルペプチド、および膜貫通ヘリックスを含むシングルパス型I膜貫通型糖タンパク質であり、ジスルフィド結合と潜在的なグリコシル化部位を有します。
• 発現は血球に高度に限定されており、主に好塩基球、肥満細胞、および好酸球で見られます。
• 選択的スプライシングにより、44 kDa、46 kDa、および54 kDaと推定される分子量のアイソフォームが生成されます。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原（細胞外ドメイン、アミノ酸17-363）から、本抗体がヒトSiglec-8の膜近位領域を認識することが示唆されます。アッセイにおいて細胞表面染色と細胞内染色を区別して確認することを検討してください。
• これは直接標識された抗体であるため、二次染色ステップは不要です。フローサイトメトリーでは、必要に応じて細胞を固定し、光曝露を最小限に抑えてください。
• 抗体の希釈系列を作成し、特定のサンプルタイプに対する最適濃度を決定してください。典型的な開始希釈率は1:50から1:200の範囲ですが、これは実験的に検証する必要があります。
• バックグラウンド結合を評価するために、同じ蛍光色素で標識した適切なアイソタイプコントロールを使用してください。
• Siglec-8の発現は好塩基球、肥満細胞、および好酸球に限定されています。細胞集団を確認するために、系列マーカー（例：CD45、CD3、CD19、CD16、CD123、HLA-DR）との共染色を行ってください。
• 全血染色の場合、赤血球の溶血または密度勾配分離を検討して白血球を濃縮し、既知の陽性コントロールと陰性コントロールを用いてゲーティング戦略を検証してください。

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