Rabbit anti-Human Syk mAb for FC (intra) - P43405

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：Sykの機能と局在

• Syk（脾臓チロシンキナーゼ、p72-Syk）は、B細胞受容体（BCR）を含む様々な膜貫通受容体の下流でシグナル伝達を仲介する非受容体型チロシンキナーゼであり、自然免疫および適応免疫、細胞接着、血小板活性化を調節します。 関連参考文献： PMID:12387735, PMID:33782605

• SykはB細胞の発生に不可欠であり、pro-Bからpre-Bへの移行期におけるB細胞の成熟に必要です。また、BCR活性化時に、BLNKやBTKなどの重要なアダプターをリン酸化し、複数の下流シグナルカスケードを開始します。 関連参考文献： PMID:12456653

• 自然免疫において、Sykは真菌病原体に対するCLEC7Aなどの受容体によって活性化され、活性酸素種（ROS）の産生、インフラマソームの活性化、NF-kBを介したサイトカイン転写につながります。

• Sykはまた、非免疫系のコンテキストでも機能し、インテグリン介在性細胞接着、破骨細胞の成熟、コラーゲンによる血小板活性化、および血管発生に関与します。 関連参考文献： PMID:12387735

• 細胞レベルでは、Sykは細胞質と細胞膜に存在し、そこでリン酸化されたITAM含有受容体またはアダプターとシグナル複合体を形成します。

• Sykは、造血組織、特にpro-Bから形質細胞に至るB細胞系統および好中球に広く発現しており、適応免疫および自然免疫応答の両方における役割を支持しています。 関連参考文献： PMID:8163536, PMID:15123770

• 2つのSH2ドメインを持つキナーゼとして、Sykはチロシンのリン酸化を触媒し、リン酸化とユビキチン化によって調節されます。変異は免疫疾患やがんと関連しています。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 細胞内フローサイトメトリーの場合、抗体が細胞質および膜結合型Sykにアクセスできるように、適切な固定と透過処理を行ってください。既知のSyk発現細胞株（例：Bリンパ球系細胞株）と適切なネガティブコントロールを使用してプロトコルを検証してください。
• 免疫原はヒトSykの中央領域（アミノ酸251-350）の配列に対応しているため、エピトープが保存されていれば、この抗体は両方のアイソフォーム（p72-Sykおよびp70-Syk）を認識する可能性があります。アイソフォームの識別が必要な場合は、ウェスタンブロットまたは質量分析によってサンプル中の特異性を確認してください。
• 実験系で最適な染色指数が得られるように、抗体を滴定してください。細胞内アッセイではバックグラウンドが増加する可能性があるため、死細胞を除外するために生存染料を使用することを検討してください。
• 非特異的結合を評価するために、常に同じ蛍光色素で標識されたアイソタイプコントロールを含めてください。

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