Rabbit anti-Human TNF-α Monoclonal Antibody for Flow Cytometry (Intracellular) - P01375

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：TNF-αの機能と局在

• 腫瘍壊死因子（TNF-α）は、カヘクチンやTNFSF2としても知られ、第6染色体6p21.3上のTNF遺伝子によってコードされる26 kDaのサイトカインです。

• 主にマクロファージから分泌されるTNF-αは、強力な内生性発熱物質として機能し、直接またはIL-1を介して発熱を誘導し、慢性炎症および癌における悪液質の重要なメディエーターとなります。

• TNFRSF1A/TNFR1およびTNFRSF1B/TNFBRに結合し、広範囲の細胞種において細胞生存、アポトーシス、および分化を調節するシグナルカスケードを引き起こします。

• このサイトカインはII型膜タンパク質として合成され、その可溶性細胞外ドメインはTACE/ADAM17によって切断され、局所的な隣接分泌および全身的な内分泌様活性の両方を可能にします。

• 翻訳後修飾には、糖鎖付加、ジスルフィド結合の形成、ミリストイル化、およびリン酸化が含まれ、これらは適切なフォールディング、輸送、および受容体結合に重要です。

• 関節リウマチにおいて、TNF-αは、PP1介在性のFOXP3転写因子の脱リン酸化および不活性化を通じて、制御性T細胞（Treg）機能を障害することにより、自己免疫性炎症を促進します（PubMed:23396208）。

  関連文献： PMID:23396208

• TNF-αは、SMACミメティクス薬と組み合わせて膀胱がん細胞に対する好中球依存性細胞障害を仲介することにより、抗がん免疫に寄与します（PubMed:16829952、PubMed:22517918）。

  関連文献： PMID:16829952、PMID:22517918

• IL-1βおよびIL-6と相乗的にVEGF産生を誘導して血管新生を促進し（PubMed:12794819）、破骨細胞形成を刺激して、炎症性疾患における骨破壊を駆動します（By similarity）。

  関連文献： PMID:12794819

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原は細胞外ドメイン（アミノ酸77-233）にわたっているため、この抗体は膜結合型および可溶性型の両方のTNF-αを認識すると期待されます。
• 細胞内フローサイトメトリーの場合、細胞質TNF-αにアクセスできるように、適切な透過処理および固定プロトコルを確実に実行してください。活性化単球などの既知の陽性コントロールの使用を検討してください。
• 関連するサンプル系で抗体を検証してください。細胞内染色用のTNF-α発現を誘導するために、LPSで刺激したヒト全血またはPBMCを使用できます。
• TNF-αは分泌されるため、細胞内タンパク質を蓄積させるために、細胞刺激中にタンパク質輸送阻害剤（例：ブレフェルディンAまたはモネンシン）を使用することをお勧めします。
• 抗体の滴定を行い、適切なアイソタイプコントロールを使用して、非特異的な結合を避けるよう注意してください。

CamelBio：ワンストップ調達パートナー

CamelBioは、体外診断薬（IVD）メーカー、研究所、研究機関に対し、コンセプトから臨床に至るまで、IVD原材料へのワンストップアクセスを提供します。TNF-α関連の免疫腫瘍学および炎症研究のために、検証済みの抗体ペア、最適化されたモノクローナル/ポリクローナル抗体、大量の補助試薬を供給し、アッセイ開発を支援するために希少ターゲットの調達も可能です。調達プロセスを合理化し、プロジェクトのタイムラインを加速させるために、お気軽にお問い合わせください。