フローサイトメトリー用ウサギ抗ヒト/サルCD4モノクローナル抗体 - P01730

製品の主な仕様・パラメータ

生物学的背景：CD4の機能と局在

• CD4は分子量51 kDaのI型膜貫通糖タンパク質であり、免疫グロブリンスーパーファミリーの一員です。4つの細胞外Ig様ドメイン、1本の膜貫通ヘリックス、シグナル伝達を媒介する細胞質尾部を持っています。
• MHCクラスII分子の共受容体として、CD4はT細胞受容体（TCR）と同時に抗原提示細胞上のペプチド-MHCクラスII複合体に結合し、チロシンキナーゼLCKをTCR-CD3複合体に動員して、ヘルパーT細胞の活性化、増殖、分化に必要な下流のシグナル伝達を開始します。
• ヘルパーT細胞に高発現しているほか、マクロファージ、樹状細胞、ナチュラルキラー細胞など他の免疫細胞にも存在し、分化、サイトカイン発現、細胞遊走に寄与しています。
• CD4はHIV-1の主要受容体として機能し、ウイルスが宿主細胞に侵入するのを可能にします（PubMed:12089508、PubMed:16331979、PubMed:2214026）。 関連参考文献: PMID:12089508 PMID:16331979 PMID:2214026
• HIV-1のVpuタンパク質はCD4を分解の標的とし、表面発現をダウンレギュレートすることでウイルスの病原性を促進します（PubMed:17346169）。 関連参考文献: PMID:17346169
• さらに、CD4はヒトヘルペスウイルス7（HHV-7）の受容体としても機能します（PubMed:7909607）。 関連参考文献: PMID:7909607
• CD4の翻訳後修飾には、N結合型グリコシル化、鎖間ジスルフィド結合、細胞質尾部のパルミトイル化、リン酸化が含まれ、これらによって安定性、膜結合性、シグナル伝達能が調節されています。

実験ガイダンスと技術的なヒント

• フローサイトメトリー実験の最適濃度を決定するため、抗体の力価測定を行ってください。典型的な開始濃度は1×10^6個の細胞あたり0.1～1 µgです。
• 非特異的結合の評価とゲーティング閾値の設定のため、適切なアイソタイプ対照を使用してください。
• エピトープが変性する恐れがあるため、パラホルムアルデヒドによる過剰固定は避けてください。固定が必要な場合は、調製したての2% PFAを用いて室温で15分間処理してください。
• 目詰まりを防ぐため、測定前に単細胞懸濁液を調製し、70 µmのセルストレーナーでろ過してください。
• 予想される発現パターンを確認するため、関連する生物学的サンプル（例：ヒトPBMC、カニクイザルまたはアカゲザルのリンパ球）で染色の検証を行ってください。

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