フローサイトメトリー用 ウサギ抗マウスCD140b/PDGFRβ モノクローナル抗体 - P05622

製品の主な仕様・パラメータ

生物学的背景：血小板由来増殖因子受容体βの機能と局在

• マウスではPdgfrb遺伝子にコードされる血小板由来増殖因子受容体β（PDGFRβ、PDGFR-1、CD140b）は、免疫グロブリン様の細胞外ドメインと分割された細胞内キナーゼドメインを特徴とするIII型受容体型チロシンキナーゼファミリーのメンバーです。
• ホモ二量体のPDGFB・PDGFD、ならびにPDGFAとPDGFBが形成するヘテロ二量体に対する細胞表面受容体として機能し、胚発生、細胞増殖、生存、分化、走化性、遊走に必須の役割を果たします。
• PDGFRβは血管の成熟に極めて重要であり、周皮細胞および血管平滑筋細胞の増殖、遊走、内皮細胞へのリクルートを促進し、正常な心血管系の発生に必要とされています。
• 腎臓では、糸球体へのメサンギウム細胞のリクルートと分岐した毛細血管網の形成に必要であり、腎線維化において発現が上昇します。
• リガンドの結合により、PLCG1を介したカルシウム動員とPKC活性化、PI3K-AKT、Ras-MAPK経路を含む複数の下流シグナル伝達カスケードが活性化され、細胞骨格の再構成と膜の ruffling（膜皺形成）が引き起こされます。
• この受容体は主に細胞膜に局在しますが、活性化後は細胞質小胞に内在化され、リソソーム内腔で分解されます。
• 翻訳後修飾として、N連結グリコシル化、チロシン・セリン/スレオニン残基のリン酸化、ジスルフィド結合形成、ユビキチン化があり、選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが生成されます。

実験ガイダンスと技術的なヒント

• 本抗体はで直接標識されているため、フローサイトメトリー測定に二次検出試薬は必要ありません。
• 最適な染色結果を得るため、抗体を滴定（例：細胞100万個あたり0.25～2.0 µg）し、対象の細胞種における最適なシグナル/ノイズ比を決定してください。
• 適切なFc受容体ブロッキングを行い、生存率染色を用いて死細胞を除外し、非特異的結合を低減してください。
• 免疫原はN末端細胞外ドメイン（アミノ酸32～530番）を含むため、細胞外ドメインと反応することが示唆されます。パラホルムアルデヒドによる固定は適合する可能性がありますが、事前に検証を行ってください。
• 対象集団におけるPDGFRβの発現を検証するため、既知の陽性対照（例：NIH/3T3線維芽細胞、血管平滑筋細胞）と陰性対照を必ず設けてください。

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