フローサイトメトリー用ウサギ抗マウスCD23モノクローナル抗体 - P20693

主要製品仕様・パラメータ

生物学的背景：CD23の機能と局在

• CD23はFc-ε-RII、または低親和性IgE Fc受容体としても知られるII型膜貫通タンパク質で、IgEおよびCR2/CD21の受容体として機能します。選択的スプライシングにより2つのアイソフォーム（CD23aとCD23b）が存在し、細胞質ドメインが異なります。
• B細胞上では、CD23はIgE合成とB細胞分化の主要な調節因子です。IgE依存性の抗原捕捉とその後のT細胞への提示を媒介し、体液性免疫に影響を与えます。
• マクロファージでは、CD23を介したIgE結合と抗原架橋により、L-アルギニン・一酸化窒素経路の活性化を通じて寄生虫の細胞内殺傷が誘発されます。
• CD23は主に細胞膜に局在しますが、タンパク質分解により切断されて可溶性受容体として放出されることもあり、分泌分子として免疫応答をさらに調節する働きを持ちます。
• このタンパク質はN結合型グリコシル化、パルミトイル化、ジスルフィド結合形成を含む翻訳後修飾を受けます。また、C型レクチンドメインとカルシウム結合部位を含んでいます。
• UniProtのキーワードに記載されている通り、CD23はリポタンパク質、プロテオグリカン、IgE結合タンパク質であり、多様な生化学的役割と膜会合が示されています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 本抗体の免疫原は、マウスCD23のアミノ酸50-331番を覆う組換え融合タンパク質です。この領域には細胞外レクチンドメインが含まれるため、天然タンパク質の特異的認識が確保されています。
• 本抗体は赤外領域の蛍光色素で直接標識されており、一般的なフローサイトメトリー装置と互換性があります。励起/発光プロファイル（約686/713 nm）はFITC、PE、APCなどの他の一般的な色素と良好な分離が可能です。
• フローサイトメトリーでは、CD23がB細胞や一部の骨髄系細胞に発現しているマウス脾細胞または末梢血白血球を用いて、0.5～5 µg/mLの範囲で抗体希釈率を検討することを推奨します。
• 特にFcγR発現の高いサンプルでは、非特異的結合を低減するため、適切なアイソタイプコントロールを使用し、Fc受容体ブロッキング工程を実施してください。
• 予測分子量は非グリコシル化型で約37 kDaですが、成熟糖タンパク質はSDS-PAGE上で約45～50 kDaの位置に泳動されるた、還元/変性条件が慎重に最適化されない限り、本抗体はウェスタンブロッティングには適しません。本抗体の用途はフローサイトメトリーに限定されています。
• CD23の発現レベルは活性化状態や微小環境によって変動するため、ご使用のマウス系統および対象の細胞サブセットで染色の検証を実施してください。

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