ウサギ抗マウスCD45モノクローナル抗体（IF/ICC・FC用） - P06800

製品の主な仕様・パラメータ

生物学的背景：CD45の機能と局在

• CD45（PTPRC）は受容体型チロシンタンパク質ホスファターゼで、抗原受容体を介したT細胞活性化に必須です。DPP4と結合すると、T細胞共活性化の正の制御因子として作用します。
• 本タンパク質には2つのホスファターゼドメインが存在し、1つ目は固有の酵素活性を持ち、2つ目は1つ目の基質特異性に影響を与えます。
• 選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが生成されます。その中のB220はB細胞や特定の活性化T細胞亜集団のマーカーとして広く知られています。
• CD45は主に細胞膜に局在し、シグナル伝達を調節する膜ラフトおよび免疫シナプスに多く集積しています。
• T細胞受容体が結合すると、CD45はSKAP1やFYNなどの下流エフェクターをリクルートして脱リン酸化し、LYNの活性を調節します。
• T細胞接触部位において未熟樹状細胞上のCLEC10Aと相互作用することで、Tn抗原を持つCD45が認識され、T細胞活性化の閾値を微調整して自己反応性を抑制する働きを助けます。
• 本タンパク質は高度にグリコシル化・リン酸化されており、シグナルペプチド、タンデムリピート領域、膜貫通ヘリックスを持つI型膜貫通タンパク質に分類されます。

実験ガイダンス・技術的なヒント

• 免疫原はマウスCD45の細胞外ドメイン（アミノ酸26～566番）を含み、アイソフォーム特異的な選択的スプライシングが生じる領域をカバーしているため、本抗体は複数のCD45アイソフォームを認識する可能性があります。
• フローサイトメトリーでは、最適な信号対雑音比を決定するために、該当する細胞集団（例：マウス脾細胞）で抗体の滴定を行うことを推奨します。アイソタイプコントロールや蛍光マイナスワンなどの適切なコントロールを使用し、CD45陽性白血球を正確にゲーティングしてください。
• 免疫蛍光法（IF/ICC）では、表面染色するCD45には透過処理が不要な場合がありますが、細胞内マーカーを共染色する場合は固定および透過処理条件を最適化してください。検出には遠赤外域対応のフィルターセット（例：647 nmレーザーライン）を使用してください。
• 本抗体はIF/ICCおよびFCでの使用が検証済みですが、他の用途でも使用できる可能性があります。ただし、エンドユーザー様ご自身の実験系および該当するサンプルタイプで性能を検証することを推奨します。

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