フローサイトメトリー用 標識 ウサギ 抗マウス IgM モノクローナル抗体 - P01872

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景：Ig 重鎖定常領域 Mu の機能と局在

• 免疫グロブリン重鎖定常領域 mu (IgM 重鎖定常領域) は Ighm 遺伝子 (Igh-6) によってコードされ、IgM 抗体の定常領域を構成します。
• 膜結合型 IgM (mIgM) は B 細胞受容体 (BCR) 複合体の中核成分であり、B 細胞の生存に不可欠な構成的トーンシグナルを提供し、B 細胞の選択と対立遺伝子排除を調節する pre-BCR シグナル伝達を媒介します。
• 分泌型 IgM (sIgM) は主に五量体 (時に六量体) を形成し、高い親和性による抗原認識を可能にします。自然 sIgM は多反応性で自己および病原体構造を認識し、免疫 sIgM は抗原特異的です。両者は効率的な体液性免疫応答に必要です。 関連参考文献: PMID:10899913 PMID:28135254 PMID:34788614
• sIgM は、主に Fc 受容体 (例：リンパ球上の FCMR) および補体系を介してエフェクター機能を媒介します。C1q をリクルートして古典的補体経路を開始し、C1q およびマンノース結合レクチンと共に、マクロファージによるアポトーシス細胞の貪食を促進し、自己免疫原性エピトープの除去を助けます。 関連参考文献: PMID:10899913 PMID:11062505 PMID:28135254
• 粘膜免疫において、sIgM はポリマー免疫グロブリン受容体 (PIGR) を介して粘膜上皮を輸送され、粘膜内腔を監視します。IgM-抗原複合体は、FCMR を介した逆行性トランスサイトーシスを受け、M 細胞を介して粘膜リンパ組織の抗原提示細胞へ向かうことができます。 関連参考文献: PMID:34788614
• 細胞内局在：分泌型は細胞外空間に放出されます。膜結合型は、1回膜貫通ドメインを持つ細胞膜に存在します。
• 組織特異性：骨髄、および B-1 細胞と B-2 細胞で発現します (タンパク質レベル)。
• 翻訳後修飾には、正しい折り畳みと多量体化に重要なジスルフィド結合形成とグリコシル化が含まれます。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はマウス IgM 定常領域のアミノ酸 105-454 を含むため、この抗体は可変領域特異性に関わらず、全てのマウス IgM サブクラスの定常領域を認識すると期待されます。
• フローサイトメトリーでは、マウス脾細胞または B 細胞株を用いて抗体を滴定し、最適な染色濃度を決定してください。特異性を確認するために、汎用 B 細胞マーカー (例：抗 CD19 抗体) との共染色を検討してください。
• 蛍光色素は遠赤色色素です (励起 ~650 nm, 蛍光 ~668 nm)。使用するサイトメーターが適切な赤色レーザー (例：633 nm または 640 nm) を装備していることを確認してください。
• 細胞内染色を行う場合、エピトープは定常領域内に存在し、透過化処理後も保存される可能性があるため、固定および透過化の条件を最適化してください。
• 非特異的結合を考慮するために、アイソタイプコントロール (同じ蛍光色素で標識したウサギモノクローナル抗体) を含めてください。

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