フローサイトメトリー用 標識 ラット抗マウス CD45R/B220 モノクローナル抗体 - P06800

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景: CD45R/B220 (受容体型チロシンホスファターゼC) の機能と局在

• CD45R/B220は、Ptprc遺伝子によってコードされる受容体型チロシンホスファターゼC (PTPRC) であり、白血球共通抗原 (L-CA)、リンパ球抗原5 (Ly-5)、T200としても知られています。選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが生成され、異なる分子量（例：130、140、144 kDa）のバリアントが産生されます。
• PTPRCはT細胞活性化の重要な正の調節因子として機能します：その第一ホスファターゼドメインは酵素活性を持ち、第二のドメインは基質特異性を調節します。T細胞受容体の活性化に伴い、SKAP1やFYNなどのシグナル分子をリクルートし脱リン酸化します（相同性による）。
• また、SrcファミリーキナーゼLYNを脱リン酸化し、それによってLYNキナーゼ活性を調節し、リンパ球における下流のシグナル伝達カスケードに影響を与えます。
• 細胞内局在的には、PTPRCは細胞膜に局在し、膜脂質ラフトに濃縮され、T細胞と抗原提示細胞の間の免疫シナプスに集積します。
• PTPRCは、T細胞-樹状細胞界面において未成熟樹状細胞上のCLEC10Aと相互作用します。この相互作用は、エフェクターT細胞上のTn抗原を運ぶCD45を認識し、自己反応性を制限するためにT細胞活性化の閾値を調整します。
• このタンパク質は、キーワード「糖タンパク質」および「リン酸化タンパク質」が示すように、グリコシル化およびリン酸化を受けます。これは、シグナルペプチド、大きな細胞外ドメイン、単一の膜貫通ヘリックス、および2つの細胞内ホスファターゼドメインを持つI型膜貫通タンパク質です。
• マウスでは、CD45R/B220は主にBリンパ球およびT細胞の一部に発現しており、免疫学的研究におけるB細胞系統の古典的なマーカーとなっています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• フローサイトメトリーでは、標識抗体を滴定して、特定の細胞タイプと染色プロトコルに最適な濃度を決定してください。適切な滴定により非特異的結合を低減できます。
• マルチカラーパネルにおける補正およびゲーティングパラメータを設定するために、適切なアイソタイプコントロール（同じ蛍光色素で標識されたラットIgG）を含めてください。
• 既知の陽性および陰性細胞集団（例：B細胞がCD45R/B220陽性でT細胞サブセットが大部分陰性であるマウス脾細胞）で抗体性能を検証してください。
• 大きな細胞外ドメインと複数のアイソフォームを持つため、アイソフォーム間の交差反応性が重要な場合は、このクローンが認識するエピトープに対応する組換え免疫原であることを確認してください。
• 抗体は遮光し2〜8°Cで保存してください。標識体の安定性を維持するために、凍結融解の繰り返しを避けてください。

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