WB、ELISA用 SARS-CoV-2 Spike RBD (N501Y) ウサギモノクローナル抗体 - P0DTC2

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：SARS-CoV-2 Spike RBD (N501Y) の機能と局在

• SARS-CoV-2スパイク糖タンパク質（S）は、アンジオテンシン変換酵素2（ACE2）受容体との相互作用を介して、宿主細胞へのウイルスの付着と侵入を媒介する三量体のクラスI融合タンパク質です。 関連参考文献： PMID:32142651, PMID:32155444, PMID:33607086
• これは前駆体タンパク質として合成され、S1およびS2サブユニットに切断されます。S1サブユニットにはACE2と結合する受容体結合ドメイン（RBD）が含まれ、S2サブユニットは膜融合を媒介します。
• 宿主プロテアーゼであるTMPRSS2（細胞表面）またはカテプシンL（エンドソーム内）によるS2'サイトでのS2サブユニットの切断は、融合ペプチドを露出させ、ウイルス侵入に必要な不可逆的な構造変化を引き起こします。 関連参考文献： PMID:32142651, PMID:32703818, PMID:34159616, PMID:34561887
• スパイクタンパク質は、ニューロピリン-1（NRP1）およびNRP2、インテグリン、アシアロ糖タンパク質受容体1（ASGR1）を含む代替の侵入受容体を使用でき、組織親和性に影響を与える可能性があります。 関連参考文献： PMID:33082294, PMID:33082293, PMID:35150743, PMID:34837059
• 構造的に、Sタンパク質の茎ドメインには3つのヒンジが含まれており、これによりヘッドドメインにかなりの向きの自由度が与えられます。これは受容体との結合において重要な特徴です。 関連参考文献： PMID:32817270
• これは高度にグリコシル化されており、複数のジスルフィド結合を含んでいます。また、細胞質テールにパルミトイル化サイトが存在します。スパイクタンパク質は、ウイルス粒子膜、宿主ER-ゴルジ中間区画（ERGIC）膜、および宿主細胞膜に局在しています。
• キーワードには、ウイルスの免疫回避、宿主の自然免疫応答の阻害、およびスーパー抗原活性も含まれており、細胞侵入以外の役割を示しています。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• この抗体は、SARS-CoV-2 Spike RBD（N501Y変異株）のアミノ酸450〜550にまたがる合成ペプチドを用いて作製されたため、この領域内のエピトープを認識する可能性があります。交差反応性データが必要な場合は、野生型および他の変異株に対する特異性を確認してください。
• ウェスタンブロット（WB）では、還元条件を使用し、約141 kDaの全長スパイクタンパク質の検出を向上させるために脱グリコシル化を検討してください。組換えRBDまたはスパイクトリマーをポジティブコントロールとして使用して検証してください。
• ELISAアプリケーションでは、このモノクローナル抗体はキャプチャーまたは検出試薬として使用できます。適切なコーティング濃度とブロッキング条件を、関連するサンプルマトリックスで最適化する必要があります。
• 宿主細胞への付着においてRBDが重要な役割を果たしているため、この抗体は中和研究または競合結合アッセイに役立つ可能性がありますが、そのような用途には独立した機能的検証が必要です。

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