WB、IF/ICC、ELISA用 SARS-CoV-2 Spike S1 ウサギモノクローナル抗体 - P0DTC2

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：SARS-CoV-2 Spike S1の機能と局在

• スパイク糖タンパク質（S）は、宿主のアンジオテンシン変換酵素2（ACE2）受容体に結合することでウイルスの侵入を媒介し、感染開始の重要なステップとなります。 関連参考文献： PMID:32142651 PMID:32155444 PMID:33607086
• ニューロピリン-1（NRP1）/NRP2、アシアロ糖タンパク質受容体1（ASGR1）、インテグリンなどの代替受容体もウイルスの侵入を促進する可能性があり、ACE2発現量が低い嗅上皮細胞への親和性（トロピズム）に寄与している可能性があります。 関連参考文献： PMID:33082294 PMID:33082293 PMID:35150743 PMID:34837059
• Sタンパク質は宿主プロテアーゼによって切断され、S1（受容体結合）およびS2（膜融合）サブユニットになります。TMPRSS2またはカテプシンLによるS2'サイトでの切断は、融合活性化に不可欠です。 関連参考文献： PMID:32142651 PMID:32703818 PMID:34159616 PMID:34561887
• 切断後、S2サブユニットは融合前状態から融合後の三量体ヘアピン構造へと劇的な構造変化を起こし、ウイルス膜と細胞膜を接近させて融合を引き起こします。
• 細胞内では、スパイクタンパク質はウイルス粒子膜、宿主の小胞体-ゴルジ中間体区画（ERGIC）膜、および宿主細胞膜に局在しており、その輸送および出芽サイクルを反映しています。
• Sタンパク質はスーパー抗原様の性質を持ち、ウイルスの免疫回避に関与し、宿主の自然免疫応答を抑制し、テザリン（tetherin）などの制限因子に対抗します。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原の設計：本抗体は、S1サブユニット（YP_009724390.1）内のアミノ酸200〜300にまたがる合成ペプチド（受容体結合ドメインと重複する領域）を用いて作成されました。このエピトープは多くのSARS-CoV-2分離株で保存されており、広範な反応性が示唆されます。
• ウェスタンブロット（WB）の場合、全長スパイクタンパク質の予測分子量は約141 kDaですが、サンプル調製条件によっては、S1切断産物（約80 kDa）が検出される場合があります。SARS-CoV-2感染細胞のライセートまたは組換えS1タンパク質を用いて検証してください。
• 免疫蛍光法（IF/ICC）では、感染細胞内の細胞内スパイクタンパク質を検出するために、透過処理プロトコルを検討してください。オルガネラマーカーとの二重染色は、細胞内局在の研究に役立ちます。
• ELISAアプリケーションの場合、本抗体は、組換えS1タンパク質またはウイルス粒子の定量のための捕捉または検出試薬として使用できます。関連するSARS-CoV-2変異株に対する力価と交差反応性を確認する必要があります。
• すべての研究用抗体と同様に、各アッセイおよびサンプルタイプに対して、最適な作業希釈倍率を実験的に決定する必要があります。

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