対称性ジメチル化ヒストンH3-R8 ウサギポリクローナル抗体 (Q16695/P68431) WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA、ChIP-seq用

主要製品仕様・パラメータ

生物学的背景：ヒストンH3.1t / ヒストンH3.1の機能と局在

ヒストンH3バリアント（H3-4/HIST3H3がコードするH3.1t、およびH3C1～H3C12などの複数の遺伝子クラスターがコードするH3.1を含む）は、ヌクレオソームのコア成分です。ヌクレオソームはDNAを巻き付けて凝縮しクロマチンを形成することでDNAへのアクセスを制限し、転写調節、DNA修復、DNA複製、染色体の安定性維持に中心的な役割を果たしています。

関連参考文献: UniProt P68431

• これらのヒストンは「ヒストンコード」と総称される複雑な翻訳後修飾（PTM）を受け、クロマチンの動態と遺伝子発現を制御しています。その中でも、成熟型ヒストンH3の8位アルギニン（R8、UniProt配列では9位アルギニンに相当）の対称性ジメチル化は、タンパク質アルギニンメチルトランスフェラーゼ5（PRMT5）によって触媒されます。この修飾は転写抑制とヘテロクロマチン形成に関連しています。

関連参考文献: UniProt Q16695

• ヒストンH3.1t（UniProt Q16695）は主に精巣細胞で発現する精巣特異的バリアントであるのに対し、H3.1（UniProt P68431）は体細胞の標準型バリアントです。
• 亜細胞局在：いずれのバリアントも核と染色体に局在します。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• ウエスタンブロット (WB): 約15 kDaの位置にバンドが検出されます。対称性ジメチル化特異性を確認するため、適切な陽性対照・陰性対照（例：PRMT5阻害剤未処理細胞 vs 処理細胞）を使用してください。R8me2sエピトープに対する抗体結合を検証するため、ペプチド競合アッセイの実施を推奨します。
• 免疫組織化学 (IHC-P) および免疫蛍光 (IF/ICC): エピトープのアクセス性は条件によって変動するため、固定・透過処理工程の最適化を行ってください。ヒストンH3は核タンパク質であるため、核の染色パターンを確認し、全ヒストンH3やDAPI対比染色と比較してください。
• ELISA: 本抗体は直接ELISAまたは間接ELISAで対称性ジメチル化レベルの定量に使用可能です。抗体濃度の滴定を行い、適切なブロッキング剤を使用してください。
• ChIP-seq: ヒストンH3は存在量が多いため、架橋とクロマチン断片化の最適化を行ってください。インプット材料は必要最小限に抑え、陽性・陰性のゲノム領域（例：ヘテロクロマチン領域 vs ユークロマチン領域）を用いてChIP効率を検証してください。
• 全般的なヒント：修飾特異的なシグナルを判別するため、常に非修飾ペプチド対照を含めてください。

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