対称性ジメチル化ヒストンH4-R3 (P62805) ウサギポリクローナル抗体、WB・IHC・IF/ICC・ELISA用途

主要製品仕様・パラメータ

生物学的背景：ヒストンH4の機能と局在

• ヒストンH4は、クロマチンの基本単位であるヌクレオソームを形成するコアヒストンの1つです。ヒストンH2A、H2B、H3と共にヒストン八量体を形成し、約147塩基対のDNAを巻き付けて凝縮し、遺伝物質へのアクセスを制御しています。
• このパッケージングは、転写、複製、修復、染色体の安定性維持といったDNAを鋳型とするプロセスに不可欠です。クロマチン構造の動的制御は「ヒストンコード」とも呼ばれる、ヒストンの翻訳後修飾（PTM）によって制御されています。
• ヒストンH4は主に核内に存在し、染色体と結合しています。例えば精子形成時のアセチル化など、特定の修飾が生じた場合に核内に局在します。
• H4はアセチル化、メチル化、リン酸化、シトルリン化、各種アシル化を含む多様な翻訳後修飾を受けます。これらの修飾は複数の残基で生じ、それぞれ異なる下流イベントを制御しています。
• アルギニン3の対称性ジメチル化（H4R3me2s）はタンパク質アルギニンメチルトランスフェラーゼPRMT5およびPRMT7によって触媒されます。この修飾は転写制御に関与しており、ヒストンコードを構成する多くの修飾マークの1つです。 関連参考文献： UniProt P62805。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 本抗体はヒトヒストンH4 (NP_003529.1) のアミノ酸1-100番を含む合成ペプチドで、Arg3が対称性ジメチル化されたものを免疫原として作製されています。免疫原の設計から修飾型に対する特異性が示唆されますが、非修飾型や他の修飾型との交差反応性については評価を行ってください。
• ウエスタンブロッティング（WB）の場合、ヒストンH4の予測分子量は約11 kDaです。ポジティブコントロールとして核抽出物またはヒストン濃縮調製物を使用することを推奨します。ロード前にサンプルの還元および変性処理を行ってください。
• 免疫組織化学（IHC）および免疫蛍光（IF/ICC）では、特にホルマリン固定パラフィン包埋組織の場合、エピトープを露出させるために抗原賦活処理が必要となることがあります。複数の抗原賦活方法を試験してください。
• ペプチド競合アッセイやメチルトランスフェラーゼ阻害剤処理細胞との比較など、適切な対照を用いて抗体の特異性を検証してください。
• ヒストンH4の配列保存性が高いことから、広範な種での反応が予測されていますが、ご使用のモデル系で反応性を確認してください。
• 各用途に応じて実験的に希釈率を最適化してください。ヒストン修飾を対象とするポリクローナル抗体の既存プロトコルから、典型的な開始希釈率を適用することができます。

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