トポイソメラーゼIIα/TOP2A ウサギmAb（WB、IF/ICC、IF-P、IHC-P、ELISA用）- P11388

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：トポイソメラーゼIIαの機能と局在

• DNAトポイソメラーゼ2-α（TOP2A）は、DNAに一過性の二本鎖切断を生じさせ、無傷のDNA鎖を切断部位に通過させた後、再結合することでDNAトポロジーを変化させる、重要な脱カテネーション酵素です。 関連文献： PMID:17567603 PMID:18790802 PMID:22013166
• この酵素は、複製、転写、染色体分離、およびDNAのトポロジー操作を必要とするその他の過程で生じるDNAのもつれやスーパーコイルを解消するために不可欠です。
• TOP2AはII型トポイソメラーゼファミリーに属し、ホモ二量体として存在します。また、DNAトポイソメラーゼIIαアイソザイムとしても知られています。
• このタンパク質は細胞質、核質、核小体に局在しており、核DNA代謝および有糸分裂時の染色体構築における機能と一致しています。
• UniProtのキーワードで示されているように、翻訳後修飾にはアセチル化、リン酸化、ユビキチン化が含まれます。これらの修飾は、酵素活性、安定性、細胞内局在を調節する可能性があります。
• TOP2Aは、扁桃、脾臓、リンパ節、胸腺、皮膚、膵臓、精巣、結腸、腎臓、肝臓、脳、肺などの組織で広く発現しています。高悪性度リンパ腫、肺扁平上皮腫瘍、セミノーマでは発現上昇が認められます。
• また、BMAL1転写振動の周期長に影響を与えることで、概日リズムの調節に関与する可能性があります（類似性による推定）。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトTOP2AのC末端領域内のアミノ酸1431～1531に対応する合成ペプチドであり、アイソフォーム特異性を付与する可能性のある領域を標的としています。ノックダウンまたはノックアウト対照により特異性を確認することを検討してください。
• ウエスタンブロットでは、TOP2Aの予測分子量は約174 kDaです。この高分子量タンパク質を効率的にブロッティングするため、低濃度のアクリルアミドゲル（例：6～8%）を使用し、転写時間を長めに設定してください。
• 免疫蛍光法（IF/ICC）および免疫組織化学法（IHC-P）では、核および核小体の染色パターンが予想されます。扁桃、脾臓、高悪性度リンパ腫などの既知の陽性組織と比較して検証してください。
• ELISAでは、コーティング抗原がエピトープ領域を適切に提示していることを確認してください。ペプチド競合アッセイは結合特異性の確認に役立ちます。
• 組換えウサギモノクローナル抗体であるため、高い親和性と再現性を備えています。ただし、最適な使用希釈倍率は、各アッセイおよびサンプル種ごとに実験的に決定する必要があります。

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