TriMethyl-Histone H3-K14 (Q16695 / P68431) ウサギポリクローナル抗体（WB、IF、ELISA用）

製品の主な仕様およびパラメータ

生物学的背景：ヒストンH3の機能と局在

ヒストンH3は、クロマチンの基本単位であるヌクレオソームのコア構成要素です。H2A、H2B、H4と共に8量体のヒストンコアを形成し、DNAが巻き付いてゲノムを凝縮し、DNAのアクセシビリティを調節します。この構造上の役割は、転写調節、DNA修復、DNA複製、染色体の安定性などのプロセスにおいて中心的です。ヒストンH3の機能は、アセチル化、メチル化、リン酸化などを含む複雑な翻訳後修飾（PTM）の配列によって動的に制御されており、これらは総称して「ヒストンコード」と呼ばれます。これらの修飾はクロマチン構造を変化させ、エフェクタータンパク質の結合プラットフォームとして機能します。

ヒストンH3は主に核に局在し、染色体に沿って分布しています。H3にはいくつかのバリアントが存在します：典型的なH3.1およびH3.2、複製に依存しないH3.3、および精巣特異的なH3.1t（H3-4/HIST3H3にコードされます）です。UniProtによると、H3.1tバリアント（Q16695）は精巣細胞に特異的に発現し、主要なH3.1（P68431）は遍在的に発現しています。両方のアイソフォームは高度な配列同一性を共有し、同様のPTMを受けます。

ヒストンH3のK14残基は、アセチル化（H3K14ac）やメチル化など、複数のPTMのよく知られた部位です。H3K14のトリメチル化（H3K14me3）は、最近認識された修飾であり、クロマチン調節や遺伝子発現において役割を果たす可能性があります。この抗体は、ヌクレオソームから突出し、最も強く修飾される領域であるN末端テール（aa1-100）にまたがる合成ペプチドを用いて作製されました。K14のトリメチル化型を特異的に検出することが期待されます。

関連参考文献： UniProt Q16695 UniProt P68431

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原は、ヒトヒストンH3のN末端テール（aa 1-100）に対応します。この領域は高度に保存されているため、広範な交差反応性が予測されます。ただし、本抗体は特定のPTM（トリメチルK14）を標的としているため、関心のある細胞または組織系での検証を行い、反応性と特異性を確認することをお勧めします。
• ウェスタンブロットでは、ヒストンは核DNAに強く結合しているため、酸抽出またはヒストン濃縮プロトコルにより検出感度が向上する場合があります。ローディングの差を正規化するために、適切なローディングコントロール（全H3またはH4など）を使用してください。
• 免疫蛍光/ICCの場合、パラホルムアルデヒドによる固定と、その後のTriton X-100による透過処理は、核内標的に対して通常有効です。ただし、エピトープは過剰な固定に敏感な場合があるため、固定時間および洗剤の濃度を最適化してください。
• PTM特異的抗体は、他の修飾とある程度の交差反応性を示す可能性があるため、ペプチド競合アッセイ（例：抗体をトリメチルK14ペプチドと、未修飾またはモノ/ジメチルペプチドで予めインキュベートするなど）を使用して、実験条件下での特異性を確認することを検討してください。
• ELISAはアプリケーションとしてリストされています。コーティングには、ヒストンペプチドまたは精製ヌクレオソームを使用できます。コーティングがK14me3エピトープを十分にカバーしていることを確認してください。

CamelBio：ワンストップ調達パートナー

CamelBioはIVD（体外診断）原料の包括的な調達パートナーとして、コンセプトから臨床まで診断薬開発を加速させるワンストップ調達ソリューションを提供します。このTriMethyl-Histone H3-K14ウサギポリクローナル抗体に加え、CamelBioは検証済みの抗体ペア、様々なヒストン修飾用に最適化されたモノクローナル/ポリクローナル抗体、バルクの補助試薬、およびレアターゲット原料のカスタム調達を提供しています。クロマチン生物学アッセイやエピジェネティクスバイオマーカー検査の開発において、CamelBioの製品ポートフォリオは、信頼性が高く監査対応可能なサプライチェーンで、研究および製造のニーズをサポートします。