トリメチルヒストン H3-K27 マウスモノクローナル抗体 (P68431) ChIP、CUT&Tag、WB、IHC用

コア製品仕様とパラメータ

生物学的背景：ヒストンH3.1の機能と局在

• ヒストンH3.1は、クロマチンの基本的な繰り返し単位であるヌクレオソームのコア構成要素です。ヌクレオソームはDNAを巻き付け、コンパクト化し、遺伝情報へのアクセスを制御します。
• 主要なヒストンとして、H3は転写調節、DNA修復、DNA複製、染色体安定性において中心的な役割を果たします。DNAへのアクセス可能性は、'ヒストンコード'と呼ばれる一連の複雑な翻訳後修飾（PTM）によって制御され、ヌクレオソームリモデリングも関与します。
• ヒストンH3のN末端テールは、メチル化、アセチル化、リン酸化、シトルリン化など、多種多様なPTMの対象となります。これらのマークは動的であり、様々なクロマチンを鋳型とするプロセスを調整します。
• リジン27のトリメチル化（H3K27me3）は、遺伝子サイレンシングおよびヘテロクロマチン形成に関連する、よく特徴づけられた抑制マークであり、主にPolycomb抑制複合体2（PRC2）によって付加されます。
• 細胞内では、ヒストンH3.1は核に局在し、染色体と結合します。

関連参考文献: UniProt P68431

実験ガイドと技術的ヒント

• この抗体は、K27周辺のアミノ酸をカバーする合成トリメチル化ペプチドに対して作製されました。ヒストンH3のリジン27のトリメチル化された形態を特異的に認識することが期待され、未修飾または他のメチル化状態とは交差反応しない可能性があります。ペプチド競合アッセイまたは適切な陽性/陰性対照を用いて特異性を検証することを検討してください。
• ウェスタンブロット分析では、酸抽出プロトコルによるヒストンの抽出が、シグナルを改善し、バックグラウンドを低減させることがよくあります。総ヒストンH3またはヒストンH4などのローディングコントロールを使用してください。
• クロマチン免疫沈降（ChIP）およびCUT&Tagでは、抗体濃度と架橋条件を最適化してください。H3K27me3に対する高い特異性により、この抑制マークをゲノムワイドにマッピングするのに適しています。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、エピトープを露出させるために抗原賦活化（例：熱誘導エピトープ賦活化）が必要になる場合があります。関連する組織および細胞型での染色パターンを検証してください。
• 免疫蛍光（IF/ICC）では、クロマチン構造とエピトープへのアクセス可能性を維持するために、固定および透過処理条件を慎重に選択する必要があります。
• この抗体は複数のアプリケーション用に提供されていますが、最適なパフォーマンスを確保するために、必ずご自身の特定の実験システムで希釈率と条件をパイロットテストしてください。

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