TriMethyl-Histone H3-K27 ウサギモノクローナル抗体 (Q16695/P68431) for ChIP, CUT&Tag, WB

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：TriMethyl-Histone H3 (K27) の機能と局在

ヒストンH3は、H2A、H2B、H4と共にヌクレオソームを形成するコアヒストンタンパク質であり、クロマチンの基本となる繰り返し単位です。ヌクレオソームのコア構成要素として、ヒストンH3はDNAを巻き付きさせてクロマチンに凝縮し、その下にある遺伝情報へのアクセスを調節します。この構造的な役割は、染色体の安定性を維持し、転写、DNA複製、DNA修復を含む重要な核プロセスを制御するために不可欠です。

ヒストンH3は、その柔軟なN末端テールにおいて、メチル化、アセチル化、リン酸化、シトルリン化など、多岐にわたる翻訳後修飾（PTM）を受けます。これらの修飾は「ヒストンコード」と呼ばれることが多く、クロマチン構造と機能を動的に調節します。リシン27の特異的なトリメチル化（H3K27me3）は、ポリコム抑制複合体2（PRC2）によって付与される特徴的な抑制マークであり、遺伝子サイレンシング、X染色体不活化、および発生調節に関連しています。

H3.1バリアント（UniProt P68431）は広く発現しており、体細胞のヒストンH3の大部分を占めています。一方、H3.1t（H3-4、UniProt Q16695）は主に精巣細胞で発現します。両方のバリアントは核と染色体に局在し、ヌクレオソームの集合とクロマチン構成に関与します。

関連参考文献： UniProt Q16695, UniProt P68431

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原情報： 本抗体は、ヒストンH3のリシン27（K27）を含む合成トリメチル化ペプチドを用いて作製されました。この設計により、H3K27me3修飾を特異的に認識します。メチル化状態の違いを識別する必要があるアプリケーションでは、ペプチド競合アッセイを使用して特異性を検証してください。
• ウェスタンブロット（WB）： ヒストンH3の予測分子量は約15 kDaです。最適な分離のために、適切なゲル濃度（例：15% SDS-PAGE）を使用してください。バンドの特異性を確認するために、ポジティブおよびネガティブコントロール（例：H3K27me3を低減させるためにEZH2阻害剤で処理した細胞）を含めてください。
• ChIPおよびCUT&Tag： 本抗体は、クロマチン免疫沈降およびCUT&Tagアッセイに適しており、ゲノム全体または特定の遺伝子座におけるH3K27me3の分布をマッピングできます。各クロマチン投入量に対して抗体濃度を最適化し、適切なIgGコントロールを含めてください。
• ELISA： 免疫ペプチドをポジティブコントロールとして使用して検量線を作成してください。本抗体は、類似したトリメチル化モチーフを含むペプチドと交差反応する可能性があるため、関連するサンプル系で検証してください。

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